海洋拮抗放線菌的篩選、鑒定及其活性研究.pdf

1、本研究旨在從石蜐、海螺等海洋樣品中分離放線菌，并進(jìn)行初步的分類鑒定；同時(shí)對(duì)篩選到的放線菌菌株進(jìn)行抗菌活性（細(xì)菌、真菌）、細(xì)胞毒性的研究，并對(duì)拮抗活性較好的菌株進(jìn)行發(fā)酵放大，提取其活性化合物進(jìn)行活性驗(yàn)證。
　　在實(shí)驗(yàn)中采用幾種鹽水培養(yǎng)基作為分離培養(yǎng)基、重鉻酸鉀等作為高效廉價(jià)的雜菌抑制劑，共分離到53株放線菌。通過(guò)對(duì)海洋放線菌進(jìn)行16S rDNA測(cè)序，測(cè)序結(jié)果與來(lái)自NCBI其他16S rDNA序列的BLAST比對(duì)結(jié)果顯示篩選到的海洋放

2、線菌包括 Streptomyces、Rhodococcus、Microtetraspora、Dietzia、Nocardiopsis屬的菌株，其中Streptomyces屬占優(yōu)勢(shì)菌株，而菌株HL-4、GYS-3的16S rDNA序列提交EzBioCloud網(wǎng)站，與已發(fā)表典型菌株的比對(duì)結(jié)果顯示菌株GYS-3與Streptomyces hebeiensisYIM001(T)的同源性最高（96.49％），菌株HL-4與Streptomyces

3、 coerulescensISP5146(T)的同源性最高（98.26%），兩者在系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)上形成獨(dú)立的分支，結(jié)合表觀形態(tài)特征實(shí)驗(yàn)、生理生化特征實(shí)驗(yàn)，菌株 GYS-3、HL-4為潛在的鏈霉菌新種，且 GYS-3的可能性極高。
　　采用瓊脂塊法、濾紙片法測(cè)定放線菌對(duì)細(xì)菌、真菌的抑菌活性，CCK-8法測(cè)定放線菌對(duì)腫瘤細(xì)胞的毒性，結(jié)果26株有一定的抑菌活性，其中13株的抑菌圈直徑大于10 mm，5株大于20 mm；14株細(xì)胞毒性結(jié)果較好