小麥鄭9023新型儲藏蛋白基因avenin-likeb的克隆和原核表達(dá)分析.pdf

1、小麥品質(zhì)是小麥籽粒對其終用途的適合性,包括營養(yǎng)品質(zhì)和加工品質(zhì)兩方面。與國外相比，我國小麥的加工品質(zhì)還有差距，而人們對優(yōu)良加工品質(zhì)小麥的需求日益加大，因此小麥加工品質(zhì)改良仍然是目前小麥育種的重要目標(biāo)。小麥品質(zhì)改良最有效的途徑之一是發(fā)掘優(yōu)良品質(zhì)基因，并運用常規(guī)雜交育種和轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育優(yōu)質(zhì)新品種。
　　 小麥Avenin-like基因是新近發(fā)現(xiàn)的一類新型的種子儲藏蛋白基因，分為Avenin-like type a和Avenin-lik

2、e type b兩類。目前還未見有關(guān)Avenin-like蛋白與小麥加工品質(zhì)關(guān)系的研究報道。本研究以小麥鄭9023為研究對象，分離 avenin-like b基因，進行表達(dá)并制備該蛋白抗體，試圖分析Avenin-like b蛋白整合進入面筋蛋白聚合體的依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　 （1）從小麥鄭9023的基因組中克隆得到4個新型avenin-like b基因的ORF，長度為855bp，編碼的蛋白含有19個半胱氨酸殘基，存在著典

3、型的“Cys-Cys”結(jié)構(gòu)域，前18個氨基酸為信號肽序列。
　　 （2）本課題成功構(gòu)建了avenin-like b基因的原核表達(dá)載體pET-32a-avelb，實現(xiàn)了Avenin-like b蛋白在大腸桿菌（Escherichia coli）BL21內(nèi)表達(dá)和該蛋白的親和純化過程。并將純化的Avenin-like b蛋白免疫兔子，制備了針對Avenin-like b蛋白的多克隆抗體。
　　 （3）用本研究制備的多克隆抗體，