日糧碳水化合物水平對(duì)翹嘴紅鲌生長(zhǎng)、血液指標(biāo)及GK、G6Pase、HSC70基因表達(dá)的影響.pdf

1、翹嘴紅鲌(Erythroculter ilishaeformis)屬鯉形目(Cypriniformes)、鯉科(Cyprinidae)、鲌亞科(Cultrinae)、紅鲌屬(Erythroculter Berg)，是我國(guó)名貴淡水魚(yú)類之一，因具有生長(zhǎng)快、肉質(zhì)細(xì)嫩、肉味鮮美、氨基酸含量高等優(yōu)點(diǎn)而備受青睞，目前已成為重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種。為了探討翹嘴紅鲌利用飼料碳水化合物的能力，以及不同碳水化合物含量飼料對(duì)翹嘴紅鲌的影響，配制碳水化合物含量分別

2、為0％、13％、19％、25％和31％的飼料，選用450尾翹嘴紅鲌，分成5組，每組設(shè)三個(gè)重復(fù)。飼養(yǎng)10周后，然后測(cè)定不同碳水化合物含量日糧對(duì)翹嘴紅鲌肝臟葡萄糖激酶(Glucokinase，GK，EC2.7.1.2)、葡萄糖-6－磷酸酶(Glucose-6-phosphatase，G6Pase，EC3.1.3.9)和熱應(yīng)激蛋白(The70 kDa heat-shock cognate protein，HSC70)基因表達(dá)水平的影響，同時(shí)測(cè)

3、定了魚(yú)體生長(zhǎng)、魚(yú)體成份、肝體比、肝糖元和血液指標(biāo)等。
　　 1、翹嘴紅鲌HSC70基因的克隆
　　 克隆得到了翹嘴紅鲌HSC70 cDNA的全序列。將所得序列與其他物種的已知HSC70氨基酸序列進(jìn)行同源性比較，并進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析。結(jié)果表明，翹嘴紅鲌HSC70氨基酸序列與團(tuán)頭魴（Megalobrama amblycephala）和異育銀鯽（Carassiusauratus gibelio）同源性都高達(dá)99％以上，與斑馬魚(yú)

4、（Danio rerio）同源性也高達(dá)98％，與大口鲇（Silurus meridionalis）和虹鱒（Oncorhynchus mykiss）同源性達(dá)到95％，系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)表明翹嘴紅鲌與團(tuán)頭魴親緣關(guān)系最為接近。
　　 2、不同碳水化合物含量日糧對(duì)翹嘴紅鲌生長(zhǎng)、魚(yú)體組成、血液指標(biāo)及肝糖元的影響
　　 在翹嘴紅鲌攝食不同碳水化合物含量日糧70天后，統(tǒng)計(jì)各組的魚(yú)體重量，并計(jì)算增重率、特定生長(zhǎng)率、餌料系數(shù)等指標(biāo)。結(jié)果25％碳水

5、化合物組增重率和特定生長(zhǎng)率最高；無(wú)碳水化合物組的餌料系數(shù)最高。這說(shuō)明本試驗(yàn)的飼料配方對(duì)翹嘴紅鲌的生長(zhǎng)有一定影響。各組的豐滿度沒(méi)有顯著差異（P＞0.05），但是內(nèi)臟比和肝體比隨飼料中碳水化合物的增加成上升趨勢(shì)，與其它組相比，31％碳水化合物組肝體比和內(nèi)臟比顯著(P＜0.05)增加。表明長(zhǎng)期投喂高碳水化合物飼料可能造成了翹嘴紅鲌肝臟腫大。試驗(yàn)中投喂不同碳水化合物含量的飼料，對(duì)魚(yú)體的水分和灰分無(wú)顯著影響（P＞0.05），但與無(wú)碳水化合物組相比

6、，其它組的脂肪含量增加。表明長(zhǎng)期投喂高碳水化合物飼料增加了翹嘴紅鲌肌肉中脂肪的含量。
　　 與無(wú)碳水化合物組相比，其它各組血清中總蛋白含量顯著（P＜0.05）降低；血清甘油三酯的含量各組從0d、35d到70d總體呈下降趨勢(shì)。在35d時(shí)，從無(wú)碳水化合物組到31％碳水化合物組血清中甘油三酯的含量呈下降趨勢(shì)，在70d時(shí)，從13％碳水化合物組到31％碳水化合物組血清中甘油三酯的含量同樣呈下降趨勢(shì)。本試驗(yàn)中，在35d時(shí)，與無(wú)碳水化合物組相

7、比，其它各組血清中總膽固醇含量顯著（P＜0.05）降低，同樣在70d時(shí)，13％碳水化合物組和19％碳水化合物組顯著（P＜0.05）降低了血清中總膽固醇含量。這說(shuō)明飼料中相對(duì)較高的碳水化合物含量可能導(dǎo)致翹嘴紅鲌相關(guān)生理機(jī)能發(fā)生了變化，如糖代謝功能、肝臟組織細(xì)胞以及組織蛋白質(zhì)合成等。
　　 在翹嘴紅鲌攝食不同碳水化合物含量的飼料后，各組血糖的含量從0d、35d到70d總體呈上升趨勢(shì)。在肝糖元含量方面，無(wú)碳水化合物組肝糖元的含量從0d

8、、35d到70d總體呈上升趨勢(shì)，但是35d到70d上升趨勢(shì)不明顯，而其它各組呈現(xiàn)先上升再下降的過(guò)程；在35d時(shí)和70d時(shí)，不同組之間血糖和肝糖元的變化也比較復(fù)雜，在31％碳水化合物組表現(xiàn)了低血糖和低肝糖的現(xiàn)象。這一方面說(shuō)明飼料中碳水化合物促使了翹嘴紅鲌血糖和肝糖元的升高，但另一方面也說(shuō)明飼料中高碳水化合物飼料可能導(dǎo)致肝臟糖代謝功能異常,從而導(dǎo)致血糖和肝糖元的降低。
　　 3、飼料中不同碳水化合物水平對(duì)翹嘴紅鲌GK和G6Pase基

9、因表達(dá)的影響
　　 在翹嘴紅鲌攝食不同碳水化合物含量日糧70天后，各組GK mRNA水平隨飼料中碳水化合物含量的增加呈先上升再下降的趨勢(shì)，其中19％碳水化合物組GK表達(dá)量最高，無(wú)碳水化合物組最低。與無(wú)碳水化合物組相比，19％碳水化合物組和25％碳水化合物組GK表達(dá)量差異顯著（P＜0.05）；同樣在翹嘴紅鲌攝食不同碳水化合物含量日糧70天后，各組G6Pase mRNA水平依次呈上升的趨勢(shì)。與無(wú)碳水化合物組相比，25％碳水化合物組和

10、31％碳水化合物組G6Pase表達(dá)量差異顯著(P＜0.05)。這說(shuō)明日糧中添加相對(duì)較高的碳水化合物可能誘導(dǎo)了相關(guān)糖代謝酶的基因表達(dá)，從而更有利于魚(yú)體對(duì)碳水化合物的利用。
　　 4、飼料中不同碳水化合物水平對(duì)翹嘴紅鲌血液免疫指標(biāo)和HSC70基因表達(dá)的影響
　　 在翹嘴紅鲌攝食不同碳水化合物含量日糧70天后，與無(wú)碳水化合物組相比，25％碳水化合物組和31％碳水化合物組肝臟中HSC70 mRNA水平成增加趨勢(shì)；相應(yīng)的與無(wú)碳水化