豬糞便中伊維菌素的排泄及降解規(guī)律.pdf

1、本研究首先建立了豬糞便中伊維菌素含量的HPLC檢測方法,并研究了伊維菌素在豬糞便中的排泄規(guī)律,在實(shí)驗(yàn)室模擬條件下對光照、溫度、微生物對豬糞中伊維菌素的降解的影響做了初步的研究。
　　 豬糞樣采用乙腈溶液提取、乙腈飽和的正己烷去除蛋白和脂類雜質(zhì),然后用AgiLent SPE C18固相萃取小柱凈化提取液,之后進(jìn)行HPLC分析。所建立方法在4～400mg/kg范圍內(nèi)線性良好。在10、40和200mg/kg三個添加水平,伊維菌素的平均

2、回收率范圍在86.00％～88.59％:變異系數(shù)范圍為3.56％～4.51％,檢測限(LOD)為2mg/kg,定量限(LOQ)為4mg/kg。
　　 選用40頭健康35日齡育肥豬,隨機(jī)分成4組,試驗(yàn)組分別混飼給予30、100和200mg/kg的伊維菌素一次,同時設(shè)置對照組,在混飼給藥結(jié)束后不同的時間點(diǎn)采集新鮮糞樣。用HPLC法測定豬糞中的伊維菌素濃度。在混飼給藥后1d的豬糞便中可檢測到伊維菌素。各伊維菌素劑量添加組的排泄量在采食

3、后3.5d達(dá)到最高峰,峰濃度為13.58mg/kg、30.11 mg/kg、52.16 mg/kg。之后排泄量逐漸下降,分別在144h、168h和168h時各組豬糞中均檢測不到伊維菌素。
　　 研究了光照和避光條件下,豬糞中伊維菌素降解率的差異性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在避光條件下,豬糞中伊維菌素較穩(wěn)定,在初始濃度為20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg條件下,經(jīng)過50d的培養(yǎng),豬糞中伊維菌素濃度下降為40.22％、36.12％

4、、28.59％。在光照條件下,豬糞中伊維菌素降解較快,經(jīng)過50d后,在初始濃度為20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg條件下,濃度下降為68.56％、49.72％、40.32％。光照組和避光組的伊維菌素降解速率和半衰期差異顯著,其平均半衰期分別為55.16d和126.64d。
　　 研究了不同溫度的條件下,豬糞中伊維菌素降解率的差異性。結(jié)果表明,在相同濃度條件下,在相同的培養(yǎng)時間,溫度從15℃到35℃豬糞中伊維菌素的降解

5、率隨溫度升高而增加,但溫度為50℃時降解率反而比15℃時小,說明溫度過高會抑制伊維菌素在豬糞中的降解。在溫度分別為15℃、25℃、35℃、50℃時,經(jīng)過30d的培養(yǎng),20mg/kg伊維菌素劑量組降解率分別為23.21％、29.07％、32.38％;40mg/kg劑量組為22.08％、25.49％、30.40％;80mg/kg劑量組為18.10％、19.89％、23.80％。在相同的培養(yǎng)時間,初始濃度相同的不同的溫度處理組兩兩進(jìn)行比較均發(fā)

6、現(xiàn)P＜0.05,說明差異顯著,即在一定范圍內(nèi)環(huán)境溫度的升高可以促進(jìn)豬糞中伊維菌素的降解。
　　 不同溫度條件下,伊維菌素的半衰期差別顯著,15℃、25℃、35℃時的半衰期相應(yīng)縮短、50℃時半衰期較15℃時延長,說明一定范圍內(nèi)溫度的提高對豬糞中伊維菌素的降解有促進(jìn)作用,溫度偏高反而抑制其降解。
　　 在滅菌、未滅菌及滅菌后添加特定伊維菌素降解菌的情況下,研究豬糞中伊維菌素的降解規(guī)律。結(jié)果發(fā)現(xiàn),經(jīng)過50d的避光培養(yǎng)后,三組微

7、生物條件不同的豬糞中伊維菌素濃度變化差異明顯,未滅菌組、滅菌組、滅菌后加降解菌組的平均半衰期分別為62.9d、113.2d、33.1d。
　　 以上結(jié)果說明,豬采食含伊維菌素的飼料后一定時間內(nèi)會有相應(yīng)量的伊維菌素藥物隨糞便排出體外,殘留于豬糞中的藥物濃度隨藥物添加濃度的增加而增加。豬糞中伊維菌素的降解受光照和微生物的影響較明顯,一定范圍內(nèi)溫度的提高對豬糞中伊維菌素的降解有促進(jìn)作用。因此,可以通過加強(qiáng)光照、堆肥和添加一定濃度的高效