雞糞便中土霉素的HPLC檢測及降解規(guī)律.pdf

1、本研究首先建立了雞糞便中土霉素含量的HPLC檢測方法，并研究了土霉素在雞糞便中的排泄規(guī)律，在實驗室模擬條件下對雞糞中土霉素的光穩(wěn)定性以及細(xì)菌微生物對雞糞中土霉素的消除的影響做了初步的研究。
　　 糞樣采用Mcllvaine緩沖液提取，然后用Waters OasisR HLB固相萃取小柱凈化提取液，之后進(jìn)行HPLC分析。所建立方法在0.25～20mg/L范圍內(nèi)線性良好。在0.25、0.5和1.0mg/kg三個添加水平，土霉素的平均

2、回收率范圍在78.89％～83.35％；變異系數(shù)范圍為2.73％～4.58％，檢測限(LOD)為0.25mg/kg，定量限(LOQ)為0.5mg/kg。
　　 選用48只健康白羽肉雞，隨機分成4組，試驗組分別混飼給予100、200和400mg/kg的土霉素一次，然后在混飼給藥結(jié)束后不同的時間點采集新鮮糞樣。用HPLC法測定雞糞中的土霉素濃度。在混飼給藥后1h的雞糞便中可檢測到土霉素。100mg/kg飼料添加組土霉素的排泄量在采食

3、后6h達(dá)到最高峰，峰濃度為13.58mg/kg，200mg/kg和400mg/kg飼料添加組土霉素排泄量達(dá)到最高峰的時間為混飼給藥結(jié)束后8h，峰濃度分別為36.15mg/kg和50.73mg/kg。之后排泄量逐漸下降，分別在30h、62h和72h時各組雞糞中均檢測不出土霉素。
　　 研究了光照和避光條件下，雞糞中土霉素降解率的差異性。實驗結(jié)果表明，在避光條件下，雞糞中土霉素較穩(wěn)定，在初始濃度為10mg/kg、20mg/kg、40

4、mg/kg條件下，經(jīng)過40d的培養(yǎng)，雞糞中土霉素濃度下降為57.97％、78.88％、83.64％。在光照條件下，雞糞中土霉素很易降解，經(jīng)過40d后，在初始濃度為10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg條件下，濃度下降為0、25.87％、31.48％。光照組和避光組的土霉素降解速率和半衰期差異很明顯，其平均半衰期分別為117.5d和21.14d。
　　 用指數(shù)負(fù)增長模型可以較好地擬合土霉素在雞糞便中的動態(tài)降解過程，土壤雞糞

5、便中添加土霉素10、20和40mg/kg時，擬合曲線分別為：C=8.8365e-0.0469t、C=19.315e-0.0328t、C=39.461e-0.0252t，相關(guān)系數(shù)均大于0.97。平均消除半衰期為21.14d。
　　 在滅菌、未滅菌及滅菌后添加特定土霉素降解菌的情況下，研究雞糞中土霉素的消除規(guī)律。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過40d的避光培養(yǎng)后，三組微生物條件不同的雞糞中土霉素濃度變化差異明顯，未滅菌組、滅菌組、滅菌后加降解菌組的平