水稻條紋葉枯病毒的土傳媒介研究.pdf

1、水稻條紋葉枯?。╮ice stripe）由水稻條紋病毒（rice stripe virus, RSV）引起，是當(dāng)前在我國水稻生產(chǎn)中分布廣，發(fā)生重，為害大的重要病毒病。近年來對我國水稻生產(chǎn)造成嚴(yán)重威脅和巨大的經(jīng)濟(jì)損失，現(xiàn)已成為江蘇省水稻生產(chǎn)上的主要病害之一。
　　 江蘇省主要糧食產(chǎn)區(qū)多為稻－麥輪作為主的一年兩熟制，近年來水稻條紋葉枯病在江淮地區(qū)流行有明顯加重的趨勢。小麥條紋病毒病與水稻條紋葉枯病為同一病毒所致，因而也有人認(rèn)為，是長

2、年的稻麥輪作、兩種病害交替發(fā)生，促使了水稻條紋葉枯病的爆發(fā)或加重。
　　 自水稻條紋葉枯病在中國有研究報道以來，學(xué)術(shù)界普遍認(rèn)同水稻條紋葉枯病是由灰飛虱( Laodelphaxstriatellu)傳播的一種蟲媒病害，有關(guān)該病傳播途徑的研究也全部集中在灰飛虱上。然而，高效農(nóng)藥和連年高強(qiáng)度的殺蟲措施似乎并沒能遏制該病近年來加重的趨勢。我們在對稻麥多年輪作的試驗田的中注意到，水稻條紋葉枯病不僅有逐年加重的趨勢而且也具備一些與土傳病害類

3、似的特征。為了確定水稻感條紋葉枯病毒病除了灰飛虱刺吸傳毒外，是否存在著土傳途徑，我們從南京農(nóng)業(yè)大學(xué)水稻所網(wǎng)室連年高發(fā)條紋葉枯病的稻池土壤中，分離出42種不同形態(tài)特征的菌株，其中放線菌7種，霉菌3種，細(xì)菌32種。對所有這些菌株均以RSV的CP基因引物進(jìn)行了PCR檢查，發(fā)現(xiàn)有一個細(xì)菌菌株能擴(kuò)增出與發(fā)病水稻葉片RNA的RT-PCR產(chǎn)物類似的單一和清晰的990bp±的特異性條帶，而其余各種菌株都沒有相應(yīng)的PCR產(chǎn)物。將該菌株送兩家不同商業(yè)測序公

4、司進(jìn)行細(xì)菌16S-rRNA測序定名，兩家公司結(jié)果均為與Chryseobacterium aquaticum sp.nov.100％同源，確定該菌株為金黃桿菌屬的水生金黃桿菌。
　　 采用盆栽根系接種鑒定的方法，進(jìn)行了8次稻苗根系接種水生金黃桿菌試驗，其中感條紋葉枯病品種（日本晴、R109、武育梗）共七次、抗條紋葉枯病品種(IR36)一次。接菌后逐日觀察記錄發(fā)病情況，結(jié)果顯示感病品種的7次接菌試驗的4周發(fā)病株率為18.1～25％，

5、平均發(fā)病株率22％，發(fā)病時間持續(xù)10天左右；而7次不接菌對照的4周發(fā)病株率僅為0～2.5％，平均發(fā)病株率0.96％。不同感病品種在不同時期的接種發(fā)病率沒有太大的波動，基本上在20％左右?？箺l紋葉枯病品種IR36無論接菌與否均不發(fā)病。這表明用水生金黃桿菌根部接種確能誘發(fā)水稻條紋葉枯病毒病，而抗病品種的抗條紋葉枯病基因?qū)τ诟拷泳脖憩F(xiàn)出了充分的抗病性。
　　 為了確定接種水生金黃桿菌后發(fā)病株是否有條紋葉枯病毒，我們對參試的所有植株

6、都進(jìn)行了RT-PCR檢查。結(jié)果發(fā)現(xiàn)所有接種試驗的發(fā)病植株不僅病狀與田間自然發(fā)病株相同，而且其病葉用RSV病毒的外殼蛋白基因引物都可以擴(kuò)出一條單一清晰的990 bp的條帶，用RSV病毒的毒蛋白基因引物都能擴(kuò)出500bp的條帶，這些條帶經(jīng)外送商業(yè)公司測序表明是對應(yīng)的條紋葉枯病毒序列。而不接菌對照和無典型心葉卷曲病狀的接菌后植株除有個別的能擴(kuò)出這兩條帶之外其余植株均沒有PCR產(chǎn)物。從而初步確定，水稻條紋葉枯病也是一種土傳性病害，其病原病毒的介