水稻條紋病毒與水稻蛋白質(zhì)互作研究.pdf

1、水稻條紋葉枯病是東亞稻區(qū)水稻重要病害之一，對水稻產(chǎn)量構(gòu)成嚴(yán)重影響。迄今，關(guān)于其病原—水稻條紋病毒（rice stripe virus, RSV）編碼的蛋白與水稻寄主蛋白之間的互作關(guān)系以及病毒編碼蛋白之間的互作關(guān)系尚無系統(tǒng)研究報道。因此，開展RSV互作研究對于研究病毒致病機制具有重要參考價值。本論文采用酵母雙雜交（yeast two-hybird system, YTHS）和雙分子熒光互補（bimolecular fluorescence

2、complementation, BiFC）技術(shù)研究RSV編碼蛋白與水稻寄主蛋白間的互作以及RSV編碼蛋白間的互作，結(jié)果表明：第一、RSV編碼蛋白可與多個寄主蛋白相互作用。其中，以RdRp為誘餌篩選出的水稻寄主蛋白最多，如：磷酸核酮糖激酶（phosphoribulokinase, chloroplastic-lke, PPKase）、光合系統(tǒng)I中心亞基II（photosystem I reaction center subunit II

3、, chloroplastic-like, PSAD2）、細(xì)胞分裂素激動蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）、NADH激酶（NADH kinase-like, NADK3）等蛋白；第二、水稻寄主蛋白可與多個RSV蛋白互作。如：1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大亞基（ribulose-1,5 bisphosphate carboxylase/oxygenase large subunit

4、, RBCL）幾乎與所有RSV蛋白均有互作， NADH脫氫酶與RSV P2、MP均有互作；第三、多個水稻寄主蛋白可與同一病毒蛋白互作。例如：脫落酸受體PYL8-like、翻譯起始因子4A均與RSV P2互作， poly(A)結(jié)合蛋白、光捕獲復(fù)合體均與RSV P4互作。并采用BiFC技術(shù)進一步驗證了植物蛋白與病毒蛋白的互作。
　　RSV編碼蛋白之間的互作研究結(jié)果表明：RSV RdRp-1、-2、-3、-5、P2、Pc2C、CP、MP