龍眼焦腐病菌細(xì)胞壁降解酶及其致病機(jī)理的研究.pdf

1、焦腐病菌[Lasiodiplodia theobromae (Pat.)Griff.&Maubl]是龍眼果實(shí)生長期間潛伏侵染的主要病原菌之一。焦腐病菌在采后龍眼果實(shí)的致病過程中會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞壁降解酶，而細(xì)胞壁降解酶是引起植物致病的重要因子。本文以龍眼果肉上分離出的焦腐病菌為對象，從產(chǎn)酶條件、致病作用及酚類物質(zhì)對焦腐病菌產(chǎn)細(xì)胞壁降解酶活性的影響等三個(gè)方面著手，研究龍眼焦腐病菌細(xì)胞壁降解酶的致病機(jī)理。研究結(jié)果如下：
　　 1、焦腐病菌在

2、改良的Czaper培養(yǎng)基中能產(chǎn)生Cx、β-葡萄糖苷酶、PG和PMG 4種主要細(xì)胞壁降解酶。從培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基起始pH值、溫度、碳源、氮源幾方面單因素研究該菌株的產(chǎn)酶條件，結(jié)果表明該菌產(chǎn)酶的最適培養(yǎng)時(shí)間為6 d，產(chǎn)酶最適溫度為28℃，培養(yǎng)基最適起始pH為7.0，最適碳源為2[％]的龍眼殼粉，最適氮源為1.0[％]的磷酸二氫銨。再以培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基起始pH、碳源濃度、氮源濃度四個(gè)試驗(yàn)因素，按正交表L16(45)設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，得出焦腐病菌產(chǎn)C

3、x的最佳優(yōu)化組合條件是：培養(yǎng)時(shí)間為7 d，培養(yǎng)基起始pH值為6.5，碳源為1.5[％]的龍眼殼粉，氮源為0.2[％]的磷酸二氫銨。焦腐病菌產(chǎn)PG的最佳優(yōu)化組合條件是：培養(yǎng)時(shí)間為7 d，培養(yǎng)基起始pH值為7.0，碳源為1.5[％]的龍眼殼粉，氮源為1.0[％]的磷酸二氫銨。
　　 2、焦腐病菌細(xì)胞壁降解酶對龍眼果皮細(xì)胞膜有明顯的損傷作用。龍眼果實(shí)經(jīng)果膠酶、纖維素酶及果膠酶、纖維素酶混合酶處理后，龍眼果皮細(xì)胞膜透性增加，損傷影響以混

4、合酶處理的最嚴(yán)重，損傷率為48.11[％]，而纖維素酶和果膠酶處理的損傷率分別為36.68[％]和36.16[％]。焦腐病菌細(xì)胞壁降解酶對龍眼果皮組織有明顯的破壞作用。分別用果膠酶、纖維素酶和兩種酶的混合液處理龍眼果實(shí)，所有處理的龍眼果皮出現(xiàn)褐色、水漬狀病斑，其中以果膠酶、纖維素酶混合酶處理的破壞程度最大，果膠酶次之，纖維素酶最小。焦腐病菌侵染龍眼果實(shí)后，在果皮不同感病部位能檢測到Cx、b-葡萄糖苷酶、PG和PMG四種酶活，其中PG活性

5、最強(qiáng)。但果皮不同感病部位的Cx、β-葡萄糖苷酶、PG和PMG活性表現(xiàn)不同，其中在果皮的病健交界處最高，病斑處其次，健康處最低。
　　 3、較低濃度的鄰苯二酚(0.2 mg/L～0.5 mg/L)、間苯三酚(0.2mg/L～2.0×mg/L)和香草醛(0.2 mg/L～2.0 mg/L)對龍眼焦腐病菌產(chǎn)細(xì)胞壁降解酶都有一定的誘導(dǎo)作用，但隨著酚類物質(zhì)的濃度的升高，其產(chǎn)量逐漸下降。鄰苯二酚、間苯三酚和香草醛都能抑制龍眼焦腐病菌Cx、β