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1、本研究以不同小麥品種銘賢169,洛夫林13,水源11分別與不同條銹菌生理小種CY23,CY29,CY31,CY32構(gòu)成幾組親和與非親和組合,各組合均設(shè)健康葉片為對照,采集接種后不同時間點的葉片提取粗酶液,采用分光光度法對其進行檢測。 主要取得了一下成果: (1)明確了條銹菌細胞壁降解酶活性測定的條件:羧甲基纖維素酶(Cx)活性的測定條件為50℃,pH4.8,反應(yīng)時間30min,底物濃度為0.6%羧甲基纖維素鈉,以DNS法
2、測定,且失活酶液的滅活時間應(yīng)大于10min:β-葡萄糖苷酶(β-G)活性的測定條件為:50℃,pH4.8,反應(yīng)時間30min,底物濃度為0.5%水楊苷,以DNS法測定,且失活酶液的滅活時間應(yīng)大于15min;果膠酶活性的測定條件為:50℃,pH4.8,反應(yīng)時間1h,底物濃度為0.25%果膠,以DNS法測定,且失活酶液的滅活時間應(yīng)大于10min。 (2)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn):在所有接種處理和未接種健康對照的小麥葉片中均可檢測到羧甲基纖維素酶
3、(Cx)、β-葡萄糖苷酶(β-G)及聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)三種細胞壁降解酶活性。在不同親和組合中,盡管健康對照及接種處理的酶活性在不同時間段有較大的變化,但接種處理的Cx、β-G、PMG三種酶活性在條銹菌侵染后48h-72h明顯高于對照,且差值在接種后48h或72h達到最大,比對照高29.6%~79.3%不等,經(jīng)方差分析,這種差異具有顯著性。此時恰好是吸器母細胞開始大量形成之時,說明細胞壁降解酶的分泌可能與吸器母細胞的形成有關(guān),在
4、條銹菌穿透寄主細胞壁過程中具有一定的作用。 (3)在組合銘賢169-CY23,洛夫林13-CY29,水源11-CY31中,胞壁降解酶活性在168h后有明顯回升,經(jīng)方差分析具有顯著性。此時正逢夏孢子開始大量產(chǎn)生,從而推測,細胞壁降解酶此時的作用是降解寄主細胞壁以獲取足夠的營養(yǎng)供夏孢子產(chǎn)生。 (4)在洛夫林13-CY23構(gòu)成的非親和組合中,接種處理的酶活性在所有的時間點幾乎都低于健康對照,這與親和組合的酶活性變化趨勢完全不一
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