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1、條銹病是全世界小麥的主要病害之一,在我國(guó)曾多次流行造成嚴(yán)重?fù)p失。為了降低小麥條銹病的危害,科技工作者對(duì)條銹病進(jìn)行了大量的研究,但研究主要集中在抗病品種選育和條銹病的化學(xué)防治方面,而在病原菌方面的研究相對(duì)薄弱,對(duì)不同生理小種的鑒定至今仍依靠寄主植物。為了揭示小麥條銹病病原菌生理小種之間的差異,本研究對(duì)當(dāng)前流行的主要生理小種的顯微和超顯微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀察;同時(shí),以小麥品種銘賢169及條銹菌生理小種水4和條混合菌種為材料,研究了小麥感病后幾丁質(zhì)
2、酶和β-1,3-葡聚糖酶活性變化,以期為小麥條銹病病原菌生理小種超顯微結(jié)構(gòu)研究、生理小種形態(tài)學(xué)差異和病原菌控制提供參考依據(jù)。主要結(jié)果如下: 1.小麥條銹病主要流行小種顯微結(jié)構(gòu)差異。將小麥條銹菌生理小種條32號(hào)、水源4號(hào)、水源14號(hào)、水源7號(hào)、HY8夏孢子接種于0.3克葡萄糖培養(yǎng)基上,保存于4℃冰箱內(nèi)。分別于8h、12h、24h進(jìn)行熒光染色,觀察夏孢子萌發(fā)及芽管結(jié)合現(xiàn)象。發(fā)現(xiàn)成熟的夏孢子經(jīng)熒光染料DAPI處理后,其細(xì)胞核在熒光顯微
3、鏡(x100)下呈淡藍(lán)色熒光,所觀察的5個(gè)生理小種夏孢子多為雙核,經(jīng)過(guò)24個(gè)小時(shí)的培養(yǎng)后,HY8、水4、水7和水14均能看到明顯的芽管結(jié)合現(xiàn)象,而條32則無(wú)明顯的芽管結(jié)合現(xiàn)象。 2.小麥條銹病主要流行小種超顯微結(jié)構(gòu)差異。通過(guò)5000倍掃描電鏡觀察,5個(gè)被觀察生理小種成熟夏孢子均出現(xiàn)原生質(zhì)光澤度較強(qiáng),并聚集有大量的脂肪粒。細(xì)胞呈球形或卵球形,雙核相近排列;在夏孢子壁上存在有大量圓椎狀的突刺。不同生理小種的表面刺突疏密程度不一,并有
4、不同程度的凹陷。 3.幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶活性變化。利用分光光度法檢測(cè)小麥幼苗接種后10d內(nèi)葉片中總酶液、細(xì)胞間隙液和細(xì)胞胞內(nèi)液中幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶活性變化情況。從總酶液中的酶活性變化來(lái)看,幾丁質(zhì)酶活性變化為銘賢169-混合組合在2dpi就高出銘賢169-水4組合與不接種對(duì)照,然而在4dpi時(shí),銘賢169-混合組合酶活性略有下降,而銘賢169-水4組合葉片中活性大幅上升并且超出銘賢169-混合組合。之后,6
5、dpi時(shí)銘賢169-水4組合葉片中酶活性又立即下降至與對(duì)照相當(dāng)?shù)乃?,銘賢169-混合組合中卻再次出現(xiàn)酶活性高峰。銘賢169-水4組合的β-1,3-葡聚糖酶活性在1-10dpi內(nèi)始終都保持穩(wěn)定的增長(zhǎng),而銘賢169-混合組合在2dpi時(shí)酶活性達(dá)到峰值后逐漸下降。銘賢169-水4組合酶活性快速上升,在10dpi時(shí)達(dá)到峰值。在細(xì)胞間隙液中,幾丁質(zhì)酶活性在銘賢169-混合組合中比銘賢169-水4組合高,銘賢169-水4組合在4dpiβ-1,3-
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