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1、河南大學(xué)碩士學(xué)位論文歐李莖尖超低溫保存及遺傳變異分析姓名:張成婉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):遺傳學(xué)指導(dǎo)教師:王子成20070501豉車薹尖超循通唧Ha遺傳毫鼻分析AbstraetThepurposeofthestudyWaStOestablishthesystemoferyopreservationofPrunushumilisBungeandthendetectthevariationofgeneticsandepigenetiesTwo
2、differentmethodswereusedinthisstudyThebetteronewaschosentoestablishthesystemofcryopreservationofPrunushumilisBungeAfterthatweestablishedthesystemoferyopreservationofsinglesiblingPrunushumilisBunge,andthenusedthissystemto
3、detectthevariationofgeneticsandepigenetiesTheresultiSshownasfollows:(1)TheregenerationofshoottipsofPrunushum///sBungeusingvitrificationisbetterthanusingencapsulationvitrification(2)Theprocedureoneryopreservationofshootti
4、psofPrunuahumilisBungebyvitrification:2030cminlengthwerepreculturedontheB5mediumsupplementedwith05m璣BAand2MGlycerolfor3daysThenabout1520姍inlengthshoottipswhichfrompreeulturedshoottips、Ⅳ骶loadedinasolutionContaining60%PVS2
5、for1020rainatroomtemperatureandincubatedinPVS2for60rainat0℃priortoadirectplungeintoliquidnitrogen(LN、Afterrapidlythawinginawalerbatha:t40℃,theshoottipswerewashedfourthwith12toolLlsucrosesolutionandtransferredOnthesalrleB
6、5mediumasthepreviousoBefor3dindarkpriortoexposuretothelightThesurvivalofshoottipsWaSuptO839%after6weeksandtheygrewanddifferentiatednormally(3)TwositesofPrunushwnilisBungeganomehadchangedaftercryopreservationTherateofchan
7、gedsiteswasabout62%outalldetectedsites(4)ThemethylatiunofPrunushwnilisBungeganomehadchangedaftercryopreservationThetotalnumberofchangesinbandspatternafterthefirsteryopreservationWitsthesameastheseconderyolnescawationOnet
8、hirdchangesofbandspatternappearednodifferenceafterfirstcryopreservationbuttheychangedafterseconderyopreservationAnotheronethirdchangedsitesofmethylationstatusseerllStohavecumulativeeffects,andabomanotheronethirdchangedsi
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