蠟梅屬植物花粉低溫及超低溫保存研究.pdf

1、蠟梅屬植物具有很高的觀賞價(jià)值，是重要的園林綠化植物之一。本研究以蠟梅屬植物花粉為材料，進(jìn)行了花粉低溫及超低溫保存技術(shù)、保存后活力測(cè)定，以及超低溫保存前后生理生化指標(biāo)變化三個(gè)方面的研究。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，初步確立了蠟梅花粉超低溫保存的技術(shù)程序。主要研究結(jié)果如下： 1.蠟梅花粉的超低溫保存程序?yàn)椋夯ǚ墼?5℃下恒溫干燥24小時(shí)后，不經(jīng)過(guò)預(yù)凍處理直接投入液氮，保存一定時(shí)間(1-360d)后取出花粉，用37℃水浴快速化凍。 2.蠟梅花粉

2、萌發(fā)培養(yǎng)基為15％蔗糖+50mg/LH3BO3+0.7％瓊脂+1.5mg/L2,4-D+0.05％Ca2+，調(diào)整各成分濃度，對(duì)花粉萌發(fā)會(huì)產(chǎn)生影響。所測(cè)的H11、H29、H46、H50四個(gè)基因型蠟梅花粉在上述培養(yǎng)基成分濃度組合中萌發(fā)率最高。 3.貯藏溫度是影響蠟梅花粉壽命的重要因素。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，室溫和4℃適合花粉的短期保存(10-15d)，例如H8、H11、H89號(hào)花粉；在-20℃、-70℃、-196℃的保存下，花粉的壽命延長(zhǎng)。H

3、5、H29、H50號(hào)花粉在液氮中保存1年時(shí)，萌發(fā)率均比保存前分別高出21.027％、23.136％、1.623％。研究表明，超低溫貯藏是解決大部分基因型蠟梅花粉長(zhǎng)期保存的有效途徑，如H5、H29、H50、H82、H86。 4.花粉活力隨干燥時(shí)間延長(zhǎng)而增加，在24h達(dá)到相比較好的萌發(fā)率，干燥時(shí)間為36h，花粉萌發(fā)率開始出現(xiàn)下降。通過(guò)測(cè)定14個(gè)基因型蠟梅的花粉在25℃下分別干燥4h、8h、12h、16h、24h、36h等六個(gè)水平的萌

4、發(fā)率，確定24h為蠟梅花粉的合適干燥時(shí)間。 5.預(yù)凍溫度和化凍方式影響蠟梅花粉超低溫保存效果。不經(jīng)預(yù)凍處理直接將花粉投入液氮保存，取出后用37℃水浴快速化凍效果較好。 6.作為保護(hù)性酶，SOD、CAT、POD的活性在蠟梅花粉超低溫保存過(guò)程中發(fā)生不同程度的變化，-196℃超低溫脅迫提高了酶活性；而逆境生理指標(biāo)MDA的含量在蠟梅花粉超低溫貯藏后增加，說(shuō)明花粉膜脂過(guò)氧化程度加強(qiáng)，膜系統(tǒng)受損；超低溫也影響蠟梅花粉的物質(zhì)代謝，使花