真菌多糖激發(fā)子的篩選及其對(duì)蛹蟲草活性物質(zhì)激發(fā)作用的研究.pdf

1、蛹蟲草是一種由蟲草菌感染相關(guān)昆蟲蛹體的蟲菌復(fù)合體,具有較高的食藥用價(jià)值。研究表明,蛹蟲草具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化等生物活性功能,被譽(yù)為冬蟲夏草的合適替代品。多糖是蛹蟲草的重要活性成分之一。本研究以蛹蟲草多糖含量為評(píng)價(jià)指標(biāo),液體發(fā)酵不同食藥用真菌菌絲體并提取多糖,以提取的多糖作為誘導(dǎo)劑分別加入蛹蟲草液體培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),篩選出能顯著提高蛹蟲草菌絲體多糖含量的真菌多糖(即真菌多糖激發(fā)子);采用響應(yīng)曲面分析法,明確真菌多糖激發(fā)子的最優(yōu)

2、激發(fā)條件,探討真菌多糖激發(fā)子提高多糖含量的作用機(jī)理。對(duì)提高蛹蟲草活性物質(zhì)的產(chǎn)量,高效開發(fā)蛹蟲草的食藥用價(jià)值及真菌資源的開發(fā)利用具有積極意義。
　　本研究以6種真菌菌種(靈芝、樟芝、樹舌、桑黃、裂褶菌和冬蟲夏草)菌絲體、3個(gè)蛹蟲草菌株(CM-js、CM-yf和CM-jd)子實(shí)體多糖作為真菌激發(fā)子來源,研究了這些真菌多糖激發(fā)子對(duì)蛹蟲草(CM-jd)菌絲體主要代謝產(chǎn)物含量的影響。結(jié)果表明,提高蛹蟲草多糖含量最明顯的激發(fā)子為CM-js大米

3、子實(shí)體多糖激發(fā)子,提高54.16％;對(duì)蛹蟲草蟲草酸含量提高顯著的為樟芝多糖激發(fā)子,提高21.96％;對(duì)蛹蟲草蟲草素含量提高明顯的為CM-js大米子實(shí)體多糖激發(fā)子,提高5.49％;對(duì)蛹蟲草腺苷含量提高最多的為靈芝多糖激發(fā)子,提高3.5％。蛹蟲草多糖激發(fā)子對(duì)蛹蟲草菌絲體代謝產(chǎn)物的激發(fā)作用優(yōu)于靈芝等其他真菌菌種,大米蟲草子實(shí)體多糖的激發(fā)效果要顯著高于蠶蛹蟲草子實(shí)體多糖的激發(fā)作用。
　　為明確真菌多糖激發(fā)子提高蛹蟲草菌絲體多糖含量的最優(yōu)條

4、件,試驗(yàn)設(shè)計(jì)真菌多糖激發(fā)子濃度、真菌多糖激發(fā)子加入時(shí)間以及真菌多糖激發(fā)子激發(fā)時(shí)間3個(gè)影響因素進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn);然后依據(jù)Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案,采用三因素三水平的響應(yīng)曲面分析方法,得出最優(yōu)條件。結(jié)果表明,提高蛹蟲草多糖含量的三個(gè)主要因素分別為:70μg/ml真菌多糖激發(fā)子濃度、第48h加入真菌多糖激發(fā)子和激發(fā)72h。得到其數(shù)學(xué)模型為: Y=320.39+2.48X1+0.4X2-0.19X3-7.43X1X2-2.27X1X3-

5、4.48X2X3-35.55X12-16.94X22-16.9X32。根據(jù)模型響應(yīng)面和等高線分析,真菌多糖激發(fā)子濃度、真菌多糖激發(fā)子加入時(shí)間以及真菌多糖激發(fā)子激發(fā)時(shí)間之間存在明顯的交互作用,進(jìn)一步驗(yàn)證了模型可靠。通過響應(yīng)曲面優(yōu)化出的最優(yōu)激發(fā)條件為:真菌多糖激發(fā)子濃度70.328μg/ml,加入時(shí)間為2 d,激發(fā)時(shí)間為3 d。
　　實(shí)驗(yàn)初步探討了真菌多糖激發(fā)子的作用機(jī)理。以α-淀粉酶、果膠酶和β-半乳糖苷酶對(duì)真菌多糖激發(fā)子進(jìn)行酶解,