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文檔簡介
1、 本實驗從楊盤二孢菌菌絲和濾液中獲得了兩種激發(fā)子粗提物。對它們處理楊樹中過氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的誘導活性進行了研究,以及對兩種激發(fā)子物質(zhì)的生物活性和穩(wěn)定性、及在不同植物過敏性反應(yīng)進行了研究;最后對激發(fā)子物質(zhì)進行了初步純化和分離。主要研究結(jié)果如下: (1)用乙醇沉淀法和細胞破壁法分別從楊盤二孢菌的培養(yǎng)濾液和菌絲中獲得兩種激發(fā)子粗提物,并用蒽酮法和考馬斯亮藍法分別測定其中糖和蛋白質(zhì)的含量,發(fā)現(xiàn)濾液激發(fā)子粗提物(
2、CFE)糖和蛋白的含量分別為41.07mg/ml和40mg/ml,而菌絲激發(fā)子粗提物(CME)糖和蛋白含量分別為48.07mg/ml和55mg/ml?! ?2)對兩種激發(fā)子的生物活性進行了測定,結(jié)果表明:菌絲激發(fā)子粗提物在誘導煙草葉片產(chǎn)生過敏反應(yīng)的有效濃度處于8.01mg/ml至48.07mg/ml(葡萄糖當量)之間,而濾液激發(fā)子粗提物誘導煙草葉片產(chǎn)生過敏反應(yīng)的有效濃度處于6.85mg/ml至41.07mg/ml(葡萄糖當量)之間。
3、 (3)對煙草過敏性細胞死亡檢測結(jié)果表明,菌絲激發(fā)子粗提物處理在20h時,處理部位細胞全部死亡;而濾液激發(fā)子粗提物處理在24h時,處理部位細胞全部死亡?! ?4)濾液激發(fā)子粗提物對溫度不敏感而對堿性條件敏感,菌絲激發(fā)子粗提物對酸堿不敏感而對溫度敏感。濾液激發(fā)子粗提物對溫度不敏感的特性,將有利于對該激發(fā)子的開發(fā)和應(yīng)用?! ?5)兩種激發(fā)子粗提物在分別用去針頭注射法處理煙草、辣椒和茄子葉片,24h后煙草上出現(xiàn)過敏性反應(yīng)。隨著時間延長,
4、煙草上過敏性斑擴大,而辣椒和茄子上沒有任何反應(yīng)。表明這兩種激發(fā)子在誘導過敏反應(yīng)方面具有一定的選擇性?! ?6)用兩種激發(fā)子粗提液處理感病楊樹和抗病楊樹品種的葉片,發(fā)現(xiàn)抗病楊樹的酶活性變化較為明顯,說明兩種激發(fā)子均是專化性激發(fā)子?! ?5)用SephadexG-100柱層析的方法初步純化兩種激發(fā)子,并且將菌絲激發(fā)子粗提物過柱后得到兩個活性組分J14和J25;濾液激發(fā)子粗提物過柱后獲得兩個活性組分L9和L16。將4個組分進行的煙草葉片過
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