檢測禽白血病病毒(ALV)的間接免疫熒光試驗(yàn)建立及我國蛋雞群中ALV感染的分子流行病學(xué)調(diào)查.pdf

1、禽白血病是由禽白血病病毒(avian leukosis virus，ALV)引起的禽類多種組織器官發(fā)生腫瘤的一類傳染性疾病，除造成禽類致瘤性死亡外，其最大的危害表現(xiàn)為免疫抑制、生產(chǎn)性能下降等亞臨床癥狀。ALV可在雞群中垂直傳播，亦能水平傳播，種群凈化是目前最有效的禽白血病防治措施。近年來，我國蛋雞群中除感染致病性較強(qiáng)的J亞群ALV(ALV-J)毒株外，A亞群ALV（ALV-A）毒株和B亞群ALV（ALV-B）毒株的感染情況也比較嚴(yán)重。因

2、此，有必要建立檢測ALV的方法，以及對我國蛋雞群中ALV的感染開展分子流行病學(xué)調(diào)查。
　　本研究從本室保存的5株針對ALV群特異抗原p27的單克隆抗體中，篩選出一株特異性強(qiáng)、敏感性高的單克隆抗體4C7，繼而以4C7單抗建立了檢測ALV p27抗原的間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)方法。結(jié)果顯示，該方法能有效檢出A、B、J亞群ALV感染，且與禽類其它致瘤性病毒（REV、MDV）無交叉反應(yīng);以10 TCID50的ALV感染DF1細(xì)胞后24

3、h即可檢出，ALV感染DF1細(xì)胞后5d的最小病毒檢出量為1 TCID50，表明所建立的IFA方法特異性強(qiáng)、敏感性高。
　　本研究從我國蛋雞群中分離到ALV15株，分離株gp85基因核苷酸序列同源性比對顯示，其中3株為ALV-A、4株為ALV-B、8株為ALV-J。分離株囊膜糖蛋白gp85基因的序列分析發(fā)現(xiàn)，其中ALV-A、ALV-B的遺傳進(jìn)化較為穩(wěn)定，與原型株具有很高的同源性，但ALV-J的變異卻較大。ALV-J分離株與原型株HP

4、RS-103以及近年來的蛋雞分離株親緣關(guān)系均較遠(yuǎn)，但與美國早期的肉雞分離株ADOL-Hc1、ADOL-7501，以及我國1999年～2003年間肉雞中的分離株的親緣關(guān)系卻很近;ALV-J分離株WX-J1216和JS-J1210與我國2011年的肉雞分離株SCAU11-H位于同一分支，表明近年來出現(xiàn)于我國蛋雞群中的ALV-J可能來源于肉雞。4株ALV-J分離株(SQ-J1211、CZ-J1212、WX-J1214、WX-J1215)與來自