廣西豬源沙門氏菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性的研究.pdf

1、沙門氏菌(Salmonella)是獸醫(yī)和醫(yī)學(xué)臨床上最常見的一類食源性人畜共患致病菌，對(duì)畜禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和人類的健康造成了極大的危害。在集約化養(yǎng)豬生產(chǎn)的過程中，為了防治豬病和促進(jìn)豬的生長，抗菌藥物被廣泛的使用，導(dǎo)致沙門氏菌的耐藥性問題日益突出。生豬是沙門氏菌的重要貯藏宿主，沙門氏菌可通過其進(jìn)行傳播，進(jìn)而對(duì)食品造成污染，危害公共衛(wèi)生。
　　 本研究從廣西區(qū)某屠宰廠的生豬和南寧、貴港、柳州三個(gè)地區(qū)規(guī)?；i場的臨床健康豬共采集樣品235

2、份，經(jīng)細(xì)菌分離純化、生化試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)、PCR鑒定和致病性試驗(yàn)等，共獲得39株沙門氏菌，檢出率為16.6％(39/235)。其中從南寧市某生豬屠宰場屠宰豬的腸道采集樣品131份，分離到沙門氏菌35株。在被調(diào)查的三個(gè)豬場中，南寧地區(qū)豬場采集新鮮豬糞樣品44份，分離到沙門氏菌1株，檢出率為2.3％(1/44)；貴港地區(qū)豬場采集新鮮豬糞樣品30份，分離到沙門氏菌1株，檢出率為3.3％(1/30)；柳州地區(qū)豬場采集新鮮豬糞樣品30份，分離到沙

3、門氏菌2株，檢出率為6.6％(2/30)。39株沙門氏菌分離株分屬4個(gè)血清群：B群19株，其中的11株為德爾卑沙門氏菌；C1群1株，為里森堡沙門氏菌；C2群1株；E1群8株；剩下的8株屬于A～F群。39株沙門氏菌中有33株對(duì)小白鼠具有致病性，致病率高達(dá)84.62％(33/39)。致病性高的有26株，死亡率為100％(3/3)，其余依次5株，死亡率為66.67％(2/3)；2株死亡率為33.33％(1/3)。對(duì)31種抗生素的感受性試驗(yàn)中，

4、39株沙門氏菌對(duì)青霉素G、新生霉素、苯唑西林的耐藥率最高，分別為100％、94.9％、94.9％。耐5種以上抗生素的多重耐藥菌株達(dá)到100％(39/39)，最常見的多重耐藥譜為：PEN-OXA-NOV-VAN-TMP，占分離菌株的84.62％(33/39)。表明廣西區(qū)不同豬群臨床健康豬不同程度攜帶有沙門氏菌，分離菌株耐藥性嚴(yán)重，多重耐藥率極高。
　　 對(duì)39株廣西沙門氏菌分離株，運(yùn)用Touch-down PCR擴(kuò)增7種毒力基因(

5、invA、hilA、sipA、sopA、sopB、sopD、sopE2)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ類整合子及27種耐藥基因：喹諾酮類耐藥基因(qnrA、qnrB、qnrS、aac(6’)-Ib)，超廣譜β-內(nèi)酰胺酶類耐藥基因(TEM、SHV、OXA、blaTEM、blaPSE)、氨基糖苷類耐藥基因(aadA1、aadA2、aadB、aph(3’)-Ⅱ a、aacC2、aac(3’)-Ⅱa、strA、strB)、磺胺類耐藥基因(sul1、sul2、su

6、l3)、氯霉素類耐藥基因(Cat1、Cat2、CmlA、Flor)、四環(huán)素類耐藥基因(tetA、tetB、tetG)。結(jié)果表明，39株沙門氏菌7種毒力基因invA、hilA、sipA、sopA、sopB、sopD、sopE2的檢出率分別為100％、87.18％、84.62％、5.13％、66.67％、48.72％、35.9％。Ⅰ類整合子檢出率為46.15％(18/39)其中可變區(qū)檢出率為7.9％(3/39)。對(duì)沙門氏菌進(jìn)行27種耐藥基因

7、的檢測(cè)，共檢測(cè)出21種耐藥基因。所檢測(cè)的耐藥基因tetA、sul2、qnrB較為普遍，檢出率分別為69.23％、69.23％、56.41％；耐藥基因Flor、tetG、TEM、blaTEM、aadA2、strB、sul1、qnrS、strA、Sul3、OXA、aph(3’)-Ⅱa、tetB、aac(6’)-Ⅰb、cmlA、aac(3)-Ⅱa、aacC2、aadA1、的檢出率分別為46.15％、41.03％、38.46％、38.46％、3