湖北省雞源沙門(mén)氏菌的分離鑒定和耐藥性分析.pdf

1、沙門(mén)氏菌(Salmonella)是一種革蘭氏陰性桿菌，可以引起雞白痢、禽傷寒和禽副傷寒等沙門(mén)氏菌病，對(duì)我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)產(chǎn)生了巨大威脅。同時(shí)，沙門(mén)氏菌也能感染人，引起嘔吐、腹瀉，甚至是敗血癥等，嚴(yán)重危害了人的生命健康。近年來(lái)，抗生素在動(dòng)物養(yǎng)殖中的廣泛使用，導(dǎo)致了沙門(mén)氏菌多重耐藥性的出現(xiàn)，這不僅會(huì)加大沙門(mén)氏菌病的防治難度，也會(huì)引發(fā)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生安全問(wèn)題。本研究從湖北省24個(gè)縣市地區(qū)送檢樣品中分離和鑒定雞源沙門(mén)氏菌94株，并鑒定其血清型，通過(guò)藥敏試

2、驗(yàn)和耐藥基因檢測(cè)，初步掌握了雞源沙門(mén)氏菌在湖北省內(nèi)的分布情況以及其耐藥表型，并探討了分離菌株血清型與耐藥表型之間的關(guān)系以及分離菌株耐藥表型與其所攜帶耐藥基因之間的關(guān)系。研究結(jié)果有利于指導(dǎo)合理應(yīng)用抗菌藥物，為雞源沙門(mén)氏菌病的防治提供理論基礎(chǔ)，同時(shí)為沙門(mén)氏菌引起的公共衛(wèi)生安全和農(nóng)產(chǎn)品安全問(wèn)題的研究提供基礎(chǔ)。
　　疑似菌株的分離鑒定和分型試驗(yàn)通過(guò)觀察細(xì)菌形態(tài)、生化特征以及PCR特異性擴(kuò)增完成對(duì)沙門(mén)氏菌的鑒定工作。94株分離菌株血清型試驗(yàn)

3、結(jié)果為:A群有49株(52.2％)，均為甲型副傷寒沙門(mén)氏菌;B群有32株(34.0％)，其中28株(29.8％)為乙型副傷寒沙門(mén)氏菌，4株(4.20％)為鼠傷寒沙門(mén)氏菌;D群有13株(13.8％)，均為傷寒沙門(mén)氏菌。
　　沙門(mén)氏菌分離菌株的耐藥試驗(yàn)94株沙門(mén)氏菌分離菌株以及參考菌株都具有多重耐藥性。其中對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素（頭孢哌酮、復(fù)方阿莫西林、頭孢噻吩、阿莫西林、苯唑西林、青霉素）、對(duì)氨基糖苷類(lèi)抗生素（安普霉素、慶大霉素、大觀

4、霉素、卡那霉素、鏈霉素）、對(duì)氯霉素類(lèi)抗生素（氯霉素）以及對(duì)磺胺類(lèi)抗生素（復(fù)方新諾明、磺胺甲噁唑）的耐藥率最高均為100％;對(duì)氟喹諾酮類(lèi)抗生素（依氟沙星、氟甲喹、奧索利酸）的耐藥率為46.3％-97.9％;對(duì)四環(huán)素類(lèi)抗生素（多西環(huán)素、四環(huán)素）的耐藥率為52.6％-74.7％;其他類(lèi)抗生素（呋喃妥因、多粘霉素E、紅霉素、林可霉素、泰洛星、普那霉素、夫西地酸、利福平、甲硝唑）的耐藥性為3.16％-100％。
　　沙門(mén)氏菌分離菌株耐藥基因

5、的檢測(cè)分別對(duì)94株分離菌株和參考菌株的DNA進(jìn)行耐藥基因的檢測(cè)，包括2種β-內(nèi)酰胺類(lèi)耐藥基因（blaTEM、blaPSE）、8種氨基糖苷類(lèi)耐藥基因(aadA1、aadA2、aadB、aacC2、aac(3)-Ⅳ、aph(3)-Ⅲ，armA、rmtB）、5種氟喹諾酮類(lèi)耐藥基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac(6)-Ib-cr)、4種四環(huán)素類(lèi)耐藥基因(tetA、tetB、tetC、tetG)、3種氯霉素類(lèi)耐藥基因（catA1

6、、floR、cmlA）以及3種磺胺類(lèi)耐藥基因(sulⅠ、sulⅡ、sulⅢ)等25對(duì)耐藥基因。擴(kuò)增結(jié)果表明耐藥基因blaTEM、aadA2、catA1、sulⅡ在95株沙門(mén)氏菌中均存在;另外，有71株(74.7％)沙門(mén)氏菌檢測(cè)出有tetA基因，有65株(68.4％)沙門(mén)氏菌檢測(cè)出有aadA1基因，21株(22.1％)沙門(mén)氏菌檢測(cè)出有qnrB基因。但耐藥基因aacC2、aac(3)-Ⅳ、aph(3)-Ⅲ、armA、qepA、aac(6)-

7、Ib-cr、tetB、tetC、tetG、floR、cmlA、sulⅢ在所有沙門(mén)氏菌中均未檢測(cè)到。
　　分析沙門(mén)氏菌的耐藥表型和其耐藥基因的檢測(cè)的結(jié)果，抗生素的耐受率的最大值與其耐藥基因檢出率的最大值相一致，即存在該類(lèi)抗生素的耐藥表型，就能檢測(cè)出該類(lèi)抗生素的耐藥基因，如沙門(mén)氏菌對(duì)氨基糖苷類(lèi)抗生素的耐藥率范圍較大，對(duì)安普霉素(APR)的耐藥率為0，對(duì)慶大霉素(GEN)、大觀霉素(SPE)以及卡那霉素(KAN)的耐藥率為4.21％-9

8、.47％，但對(duì)鏈霉素的耐藥率高達(dá)100％（95株）。與該表型對(duì)應(yīng)的耐藥基因的檢出率最大值為100％(aadA2、aadB)，但對(duì)armA、rmtB的檢出率為0。沙門(mén)氏菌對(duì)氨基糖苷類(lèi)抗生素的耐藥率最大值與該類(lèi)基因的檢出率最大值均為100％，同時(shí)氨基糖苷類(lèi)抗生素的耐藥率最小值與該類(lèi)基因的檢出率最小值均為0。
　　以上結(jié)果分析表明，第一，雞源沙門(mén)氏菌在湖北省各地區(qū)的分離率為9.52％，其中甲型副傷寒沙門(mén)氏菌在湖北地區(qū)最為常見(jiàn);第二，所有