南寧市售鮮肉中四種食源菌的監(jiān)測及沙門氏菌致病性和耐藥性的研究.pdf

1、沙門氏菌(Salmonella spp)、大腸桿菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7，E.coli O157∶H7)、空腸彎曲菌（Campylobacter jejuni,C.j）以及單核細(xì)胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes，Lm）是目前世界上重要的四大食源菌，它們能引起人和動物嚴(yán)重的胃腸炎，以及人類的食物中毒，嚴(yán)重者還能導(dǎo)致人和動物的死亡。全球每年因這四大食源菌引起的食物中毒事

2、件屢見不鮮，嚴(yán)重阻礙了經(jīng)濟和社會的可持續(xù)發(fā)展。本課題研究的目的是為持續(xù)了解南寧市市售鮮肉中四大食源菌的污染現(xiàn)狀，以及深入研究食源性Salmonella分離株的致病性與耐藥性情況。
　　本課題在2015年7月-2016年11月間分別從南寧的5個超市與4個自由市場零售的生鮮雞肉、鴨肉、牛肉、豬肉中采集了863份樣品，參照食品安全國家檢驗標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合本實驗室之前建立的PCR檢測方法，對鮮肉食品中的四大食源菌進行檢測與分離;對分離到的166

3、株Salmonella分離株的血清型進行鑒定，并與本實驗室同期分離的159株雞源Salmonella分離株的血清型進行對比分析;研究了鮮肉源中優(yōu)勢血清型的Salmonella分離株對小鼠的致病力表型，并設(shè)計引物對這些菌株的9種毒力基因進行檢測;檢測了166株Salmonella分離株對16種常見抗生素的耐藥表型及其13種耐藥基因。
　　863份市售鮮肉中四種食源菌的檢測結(jié)果顯示，Salmonella的檢出率最高(19.24％，16

4、6/863)，然后依次為E.coli O157∶H7(14.60％，126/863)、C.j(8.92％，77/863)、Lm(0.81％，7/863);對比四種食源菌在超市與自由市場的檢出率發(fā)現(xiàn)，Sa lm on ella在超市的檢出率(22.20％，93/419)高于自由市場的(16.44％，73/444)，而Lm僅在超市樣品中檢出(1.43％,6/419);不同肉類的檢出情況顯示，豬肉中Salmonella和E.coli O157

5、∶H7的檢出率要高于其他肉類的，禽肉中C.j的檢出率要高于其肉類的，而Lm在牛肉中的檢出率最高;四種食源菌在不同市場的檢出率存在明顯的差異，Salmonella在D超市中的檢出率最高，E.coli O157∶H7與C.j在I市場中的檢出率最高，而Lm僅在E超市中有檢出;此外，Salmonella、E.coli O157∶H7在夏秋兩季的檢出率比冬春兩季的相對較高，C.j的檢出率在夏季較高，Lm全年各月的檢出率均較低，缺乏明顯季節(jié)性差異。

6、
　　166株鮮肉Salmonella分離株血清型的鑒定結(jié)果顯示，分離株共涵蓋9個血清群的68個血清型，其中優(yōu)勢血清群為B群，優(yōu)勢血清型為S.agona(15.06％)、S.derby(15.06％)、S.enteritidis(5.42％)、S.riggil(4.82％)、S.rissen(3.61％)、S.typhimurium(3.61％)。對比市售鮮雞肉源與雞源Salmonella的血清型發(fā)現(xiàn)，市售鮮雞肉中Salmonel

7、la血清型共涵蓋了8個血清群的30種血清型，其優(yōu)勢血清型為S.agona(15.91％)、S.derby(9.09％)、S.enteritidis(6.82％)、S.menston(6.82％)、S.chartres(4.55％);雞源Salmonella分離株則涵蓋8個血清群的26個血清型，其優(yōu)勢血清群為B群，優(yōu)勢血清型為S.pullorum(75.47％)、S.gallinarum(2.52％);有S.agona、S.typhimu

8、rium、S.menston、S.braenderup、S.newlands、S.blegdam共6種血清型在兩者中均有檢出;肉源的優(yōu)勢血清型S.agona、S.derby、S.enteritidis、S.typhimurium分離株對人工攻毒小鼠均有40％-70％的致死率，而且致死率的高低與菌株毒力島SPI-2中的sseL基因有關(guān)。
　　166株鮮肉Salmonella分離株對八大類共16種常見抗生素的藥敏試驗結(jié)果顯示，89.1

9、6％(148/166)的分離株對供試的16種抗生素均存在不同程度的耐藥性，其中對四環(huán)素的耐藥率最高(72.29％)，其次為氨芐西林、氯霉素、阿莫西林、復(fù)方新諾明;多重耐藥檢測結(jié)果顯示，74.10％的分離株對供試抗生素表現(xiàn)出多重耐藥性，55.42％的分離株可以耐受2-7種抗生素、10.24％的分離株能耐受10種及以上的抗生素，最多的可耐14種抗生素;對比雞肉源與雞源分離株的耐藥性的發(fā)現(xiàn)，雞肉源中的多重耐藥現(xiàn)象比雞源的嚴(yán)重，67.44％的雞

10、肉源分離株表現(xiàn)出多重耐藥性，而雞源的只有28.06％。雞肉源分離株中10耐及以上的有13.95％，而雞源的只有2.88％;對β-內(nèi)酰胺類磺胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類四大類抗生素共13種耐藥基因的檢測結(jié)果顯示，13種耐藥基因均可檢出。四大類抗生素的耐藥表型與耐藥基因的符合率分析顯示，符合率都在80.00％以上，其中β-內(nèi)酰胺類抗生素的符合率最高(96.70％)。
　　本課題研究結(jié)果顯示，南寧市市售鮮肉食品中均存在四種食源性致病菌的污