非小細胞肺癌MK、DPC4-Smad4的表達及其相關(guān)性的研究.pdf

1、目的：肺癌是最常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率是惡性腫瘤中連續(xù)60年來唯一逐年明顯上升的腫瘤。了解肺癌發(fā)生發(fā)展的分子機制將有利于肺癌的診治及預(yù)防。當人體的癌基因和抑癌基因平衡被打破，從而引起細胞增殖失控，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。
　　 許多研究表明生長因子不僅促進組織細胞的增殖，而且能誘導(dǎo)組織細胞的惡性轉(zhuǎn)化。中期因子(Midkine，MDK，MK)是一類肝素結(jié)合性生長因子，已有研究證實，在多種腫瘤組織中MK高表達，包括食管癌、胃癌

2、、結(jié)直腸癌和胰腺癌等。MK具有多種生物學功能，它不僅在神經(jīng)發(fā)育過程中起到營養(yǎng)及保護作用，還通過促有絲分裂和細胞增殖、促血管生成、誘導(dǎo)細胞惡性轉(zhuǎn)化、抗凋亡等功能影響腫瘤細胞的增殖、分化及凋亡。
　　 細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)著多細胞生物的生長、發(fā)育、分裂及死亡等生物學行為，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，腫瘤抑制基因DPC4/Smad4編碼的蛋白是轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforminggrowthfactor-B，TGF-β)超家族細胞內(nèi)

3、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和調(diào)節(jié)的中心分子。有研究表明，Smad4的失活與表達缺失和多種腫瘤的發(fā)展、組織細胞分級以及預(yù)后有一定的關(guān)系。
　　 目前對于MK和DPC4/Smad4的研究并不少見，但是對于肺癌組織中MK和DPC4/Smad4的表達與相關(guān)性的研究，以及二者在肺癌分期、病例分型的關(guān)系方面的研究尚處于相對空白狀態(tài)。本研究旨在通過運用免疫組化的方法檢測MK和DPC4/Smad4在肺癌及癌旁組織中的表達，探討其在肺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。進一步揭

4、示二者在肺癌發(fā)生過程中是否存在相關(guān)性。為基因水平的肺癌檢測及治療提供理論基礎(chǔ)和依據(jù)。
　　 方法：收集經(jīng)手術(shù)切除且病理證實的非小細胞肺癌病例52例，所有患者術(shù)前未經(jīng)過化療及放療，分別記錄患者的性別、年齡、腫瘤大小、組織學類型、病理分期等臨床資料，采用免疫組化S-P法檢測標本中MK和DPC4/Smad4表達。選取無壞死的癌旁組織30例，作為陰性對照，所選取的組織距病灶切除的距離5cm以上。陽性判斷標準：每張切片選取具有代表性的5個

5、高倍視野進行觀察計數(shù)，每個視野計數(shù)100個細胞，以出現(xiàn)棕色顆粒作為陽性細胞，采用半定量積分法，分別根據(jù)染色程度和染色細胞的百分率進行分級評分，并將評分的乘積作為判定標準，以判定其陽性程度。根據(jù)染色程度：基本不染色為0分，著色淡為1分，著色適中為2分，著色深為3分；著色細胞占計數(shù)細胞的百分率：≤5％為0分，＞5％～25％為1分，＞25％～50％為2分，＞50％為3分。將每張切片的平均著色程度得分與平均細胞著色百分率得分各自相乘為最后得分：

6、≤1分為陰性（一），2～3分為陽性(+)，≥4分為強陽性(++)。應(yīng)用統(tǒng)計學軟件SPSS17.0，通過X2檢驗及Spearman相關(guān)性分析法分析二者與非小細胞肺癌的關(guān)系及二者之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果：
　　 1.52例非小細胞肺癌標本中，MK和DPC4/Smad4陽性表達率分別為59.62％(31/52)、63.46％(33/52)，30例癌旁正常肺組織的MK和DPC4/Smad4陽性表達率分別為16.67％(5/30)

7、，90.00％(27/30)，兩組比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 2.MK和DPC4/Smad4陽性表達與性別、年齡及腫瘤大小均無關(guān)系，差異無顯著性(P＞0.05)。
　　 3.MK和DPC4/Smad4陽性表達與肺癌分化程度無關(guān)系，組間差異無顯著性(P＞0.05)。
　　 4MK和DPC4/Smad4陽性表達與肺癌臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)，有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：<