茶多酚對(duì)甲醛染毒大鼠臟器損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：
　　 1.觀察甲醛吸入染毒對(duì)大鼠氣管、肺形態(tài)學(xué)及有關(guān)生化指標(biāo)的影響；同時(shí)觀察甲醛對(duì)肝臟形態(tài)、肝功能及有關(guān)生化指標(biāo)的影響，探討甲醛在該實(shí)驗(yàn)條件下是否具有遠(yuǎn)距離毒性。
　　 2.觀察茶多酚水溶液對(duì)甲醛染毒大鼠氣管、肺、肝臟的影響，探討茶多酚水溶液對(duì)甲醛染毒大鼠的臟器損傷是否具有保護(hù)作用。
　　 方法：
　　 取SPF級(jí)3月齡未交配SD大鼠30只(雌雄各半，體重201.7±27.5g)，隨機(jī)分為3組，每

2、組10只。1組為對(duì)照組(Cont)：蒸餾水5ml·kg-1·d-1灌胃，每天一次(qd)，共13周，2組為模型組(FA)：上午甲醛染毒10mg/m3，4h/d，7d/w，下午蒸餾水5ml·kg-1·d-1灌胃，qd，共13周，3組為實(shí)驗(yàn)組(TP)：上午甲醛染毒10mg/m3，4h/d，7d/w；下午茶多酚(TP)水溶液200mg·kg-1·d-1灌胃，qd，共13周。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)大鼠心臟取血處死，分離血清檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(A

3、LT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶活力(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活力，丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)含量、血清微量元素Fe、Cu、Zn含量；取氣管，石蠟包埋制片HE染色觀察病理形態(tài)變化；選取一側(cè)肺取肺泡灌洗液測(cè)堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)含量，另一側(cè)肺組織部分石蠟包埋制片HE染色觀察病理形態(tài)變化，部分肺組織勻漿測(cè)定肺組織MDA、SOD、GSH、NOS含量；肝臟稱重，肝組織部分石蠟包埋制片HE染色觀察病理形態(tài)變化，免疫組

4、化方法檢測(cè)肝組織細(xì)胞色素P4502E1的表達(dá)，部分制勻漿測(cè)定肝組織MDA、SOD、GSH含量。
　　 結(jié)果：
　　 1.甲醛對(duì)大鼠體重、血清生化指標(biāo)、氣管、肺和肝臟的影響
　　 ①甲醛導(dǎo)致大鼠體重增長(zhǎng)緩慢甚至減輕、臟器系數(shù)稍有降低。從第10周開始，與對(duì)照組比較，模型組大鼠體重減輕(P<0.01)；模型組大鼠各臟器系數(shù)除腦外均有不同程度降低，其中肺的臟器系數(shù)降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 ②甲醛導(dǎo)

5、致大鼠血清生化指標(biāo)異常。與對(duì)照組比較，模型組大鼠血清MDA、NOS均升高(P<0.05)，SOD明顯降低(P<0.01)，GSH降低(P<0.05)；Cu升高(P<0.05)，F(xiàn)e明顯降低(P<0.01)，Zn降低(P<0.05)。
　　 ③甲醛導(dǎo)致大鼠氣管、肺損傷。與對(duì)照組比較，模型組大鼠肺勻漿MDA明顯升高(P<0.01)，NOS升高(P<0.05)，SOD、GSH明顯降低(P<0.01)；模型組大鼠肺泡灌洗液中ALP含量升

6、高(P<0.05)、L DH含量明顯升高(P<0.01)：大鼠氣管粘膜不連續(xù)，粘膜上皮細(xì)胞排列不整齊，纖毛粘連、倒伏，粘膜表面粘附較多雜質(zhì)；肺組織呈現(xiàn)間質(zhì)性肺炎和肺泡性肺炎的病理學(xué)特點(diǎn)。
　　 ④甲醛導(dǎo)致大鼠肝臟損傷。與對(duì)照組比較，模型組大鼠的血清AST升高(P<0.05)、ALT明顯升高(P<0.01)；肝組織中MDA明顯升高(P<0.01)、SOD減低(P<0.05)；肝組織切片顯示：肝細(xì)胞胞漿疏松樣變性，并見肝細(xì)胞點(diǎn)狀或灶

7、狀壞死，大片炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，主要以淋巴細(xì)胞為主；肝組織CYP2E1表達(dá)增強(qiáng)，彌散性分布于肝細(xì)胞3區(qū)到2區(qū)，CYP2E1顯色指數(shù)與肝組織MDA含量呈正相關(guān)(r=0.691，P<0.01)，而與SOD含量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.444，P<0.05)。
　　 2.茶多酚對(duì)大鼠體重、血清生化指標(biāo)、氣管、肺和肝臟的影響
　　 ①茶多酚可使大鼠體重增長(zhǎng)接近正常對(duì)照組，對(duì)臟器系數(shù)影響不大。與模型組比較，從第11周開始，茶多酚組大鼠體重增長(zhǎng)

8、(P<0.05)。
　　 ②茶多酚對(duì)甲醛所致大鼠血清各指標(biāo)異常有部分逆轉(zhuǎn)作用。與模型組比較，茶多酚組大鼠血清MDA降低(P<0.05)，SOD明顯升高(P<0.01)，GSH有所升高但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；NOS無顯著性差異，但高于正常(P<0.05)；茶多酚組大鼠血清Cu降低(P<0.05)、Zn升高(P<0.05)，F(xiàn)e的變化雖然無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但明顯低于正常(P<0.01)。
　　 ③茶多酚對(duì)甲醛所致大鼠氣管、肺損傷有防治作

9、用。與模型組比較，茶多酚組大鼠肺勻漿MDA降低(P<0.05)，SOD、GSH均升高(P<0.05)，NOS有降低趨勢(shì)(P>0.05)；茶多酚組大鼠肺泡灌洗液中LDH含量降低(P<0.05)、ALP含量降低但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；茶多酚組大鼠氣管粘膜與模型組相比稍有改善，但粘膜層仍有脫失，纖毛不如正常組清晰；茶多酚組大鼠肺組織部分區(qū)域接近正常組大鼠，肺泡壁毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血、出血狀況明顯改善，但仍見小片狀肺泡間隔增寬及少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。

10、>　　 ④茶多酚對(duì)甲醛所致大鼠肝臟損傷有防治作用。與模型組比較，茶多酚組大鼠血清ALT降低(P<0.05)，AST有降低趨勢(shì)(P>0.05)；肝組織MDA降低(P<0.05)，SOD活力明顯增高(P<0.01)，GSH升高接近對(duì)照組水平；茶多酚組肝細(xì)胞索排列較整齊，肝竇清晰可見，基本接近正常，未見明顯的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，但仍偶見肝細(xì)胞點(diǎn)狀壞死；肝組織CYP2E1表達(dá)明顯受到了抑制，中央靜脈外圍仍有陽(yáng)性表達(dá)。
　　 結(jié)論：
　

11、　 1.10m/m3甲醛(4h/d，13w)可以造成大鼠氣管、肺嚴(yán)重?fù)p傷，并誘導(dǎo)肝細(xì)胞CYP4502E1的表達(dá)，肝細(xì)胞壞死輕微。
　　 2.給予大鼠200mg.kg-1.d-1的茶多酚，對(duì)甲醛導(dǎo)致的氣管及肺損傷有很大程度的逆轉(zhuǎn)，并能夠抑制肝CYP2E1的表達(dá)，抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，減輕大鼠肝臟的炎癥損傷和肝細(xì)胞壞死，使肝細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能有一定程度的逆轉(zhuǎn)，對(duì)甲醛所導(dǎo)致的肝損傷有確切的保護(hù)作用，但還不能完全恢復(fù)至正常水平。