GM1對EAE大鼠軸索損傷的保護作用.pdf

1、目的:
　　觀察單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷酯（Monosialotetrahexosylganglioside，GM1）對實驗性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis， EAE）大鼠的脊髓中趨化因子CXCL1（CXC chemokine ligand1）及神經(jīng)絲蛋白（Neurofilament protein，NF）的表達影響，探討GM1對EAE大鼠模型是否具有保護作用，

2、從而為臨床治療MS提供新的思路和實驗依據(jù)。
　　方法:
　　72只成年雌性 Wistar大鼠隨機分為：正常對照組、EAE組、EAE+大劑量GM1組、EAE+小劑量GM1組（n＝18）。正常對照組注射生理鹽水，其它各組采用自制完全抗原誘導(dǎo)EAE模型。EAE組建模后不作處理，EAE+大劑量GM1組、EAE+小劑量GM1組分別于建模后給予GM1100mg/kg.d、40mg/kg.d。比較各組發(fā)病率并行神經(jīng)功能缺損評分，取脊髓行

3、Bielschowsky銀染色、CXCL1、NF免疫組織化學(xué)染色觀察。
　　結(jié)果:
　　1.各組實驗大鼠發(fā)病率：正常組大鼠無發(fā)??；EAE組發(fā)病率為83.33％；GM1干預(yù)組發(fā)病率較EAE組明顯降低（P<0.05），而大劑量GM1干預(yù)組發(fā)病率較小劑量GM1干預(yù)組低（P<0.05）。
　　2.神經(jīng)行為評分：經(jīng)免疫誘導(dǎo)后第7天、第14天、第21天分別予以評分，在第14天、第21天，GM1干預(yù)組評分較EAE組低；第14天大劑量

4、GM1干預(yù)組評分低于小劑量GM1干預(yù)組；從三個時間點進行比較，7天組、21天組與14天組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而7天組與21天組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　3.組織病理學(xué)觀察：Bielschowsky銀染色結(jié)果示正常對照組軸索大多數(shù)走行方向一致，粗細均勻，軸索的連續(xù)性完好。余各組不同程度出現(xiàn)軸索改變，包括軸索粗細不均、腫脹、畸形，部分出現(xiàn)空泡狀淡染，有的甚至出現(xiàn)斷裂，部分形成收縮球。
　　4

5、.免疫組織化學(xué)染色：
　　4.1.脊髓組織中CXCL1表達：除正常組外，其余三組均有CXCL1陽性表達，各組CXCL1陽性細胞數(shù)比較：正常組未見CXCL1陽性細胞；與正常組相比， EAE組CXCL1表達較同期明顯增多，而經(jīng)GM1干預(yù)后，CXCL1表達量有所減少，其中大劑量GM1組CXCL1表達量低于同期小劑量GM1組，差異均有顯著性（P<0.05）。從三個時間點進行比較，第14天，大劑量GM1組CXCL1陽性細胞數(shù)低于小劑量GM1

6、組；7天組、21天組與14天組相比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而7天組與21天組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　4.2.脊髓組織中NF表達：結(jié)果示4組均有NF陽性表達。NF陽性細胞數(shù)比較：正常組NF表達量最多；EAE組NF表達較同期正常組明顯減少，而經(jīng)GM1干預(yù)后NF表達量有所增加，其中大劑量GM1組NF表達量高于同期小劑量GM1組，差異均有顯著性（P<0.05），各組三個時間點比較，第14天，大劑量 GM