DSCAM在大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)變化.pdf

1、【背景和目的】：骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)因具有很強(qiáng)的分裂、增殖及自我更新能力,傳統(tǒng)上認(rèn)為MSCs可分化為肌細(xì)胞、骨細(xì)胞、血細(xì)胞等組織細(xì)胞。近年來研究發(fā)現(xiàn)MSCs在一定的條件下可橫向分化為神經(jīng)細(xì)胞,如在有絲分裂因子、維甲酸類化合物、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、中藥等誘導(dǎo)下。唐氏綜合癥細(xì)胞粘附分子(Down syndrome cell adhesion molecule,DSCAM)的基因位于

2、21q22,其過量表達(dá),如21號(hào)染色體的三體化,即唐氏綜合癥(Downsyndrome),造成神經(jīng)細(xì)胞遷移、增殖、分化的異常,最終導(dǎo)致先天性智能發(fā)育障礙。若DSCAM表達(dá)降低則出現(xiàn)神經(jīng)連接異常機(jī)會(huì)增加。而且,DSCAM是神經(jīng)細(xì)胞連接中必須的細(xì)胞粘附分子,在軸突和樹突的生長(zhǎng)、突觸的形成、對(duì)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的形成和維持有重要作用。研究唐氏綜合癥細(xì)胞粘附分子(DSCAM)在大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)分化為神經(jīng)細(xì)胞中的作用。
　　【方法】：在

3、建立黃芩苷誘導(dǎo)大鼠MSCs分化為神經(jīng)細(xì)胞的基礎(chǔ)上,采用免疫細(xì)胞化學(xué)法、Western Blot法等檢測(cè)DSCAM的表達(dá)變化;同時(shí)采用RNA干擾技術(shù),觀察DSCAM-siRNA轉(zhuǎn)染MSCs后誘導(dǎo)分化情況。
　　【結(jié)果】：誘導(dǎo)前大鼠MSCs不表達(dá)DSCAM:預(yù)誘導(dǎo)24h:MSCs開始少量表達(dá)DSCAM(1.71％±0.67％);黃芩苷誘導(dǎo)6h,部分表達(dá)DSCAM(15.79％±4.24％);誘導(dǎo)后3d,DSCAM表達(dá)最高(53.16％

4、±5.94％);誘導(dǎo)6d,DSCAM表達(dá)明顯下降(28.99％±6.72％)。DSCAM-siRNA轉(zhuǎn)染MSCs,DSCAM表達(dá)顯著下降。而且,誘導(dǎo)前MSCs不表達(dá)神經(jīng)細(xì)胞特異性標(biāo)記蛋白β-Ⅲ-tubulin;誘導(dǎo)6h,β-Ⅲ-tubulin表達(dá)為(1.40％±0.79％)。誘導(dǎo)3d達(dá)到(41.59％±3.17％);誘導(dǎo)6d,β-Ⅲ-tubulin表達(dá)為(59.11％±4.76％)。但是,DSCAM-siRNA轉(zhuǎn)染MSCs,誘導(dǎo)3d、6