平菇生物富硒及富硒平菇蛋白的差異表達.pdf

1、本試驗通過向栽培料中添加硒酸精氨酸培育富硒平菇，研究了硒酸精氨酸對平菇菌絲生長、平菇出菇及子實體品質的影響，優(yōu)化了子實體全蛋白的提取方法，分析了富硒平菇蛋白的差異表達，為酸精氨酸在富硒平菇培育中的應用奠定了理論基礎。
　　研究了栽培料中不同濃度的硒酸精氨酸對平菇菌絲生長和出菇的影響，研究表明:硒濃度為11.07mg/kg和22.13mg/kg時，平菇菌絲長勢良好，硒酸精氨酸對平菇菌絲生長具有促進作用，硒濃度增加到44.26mg/k

2、g時，促進作用消失。硒酸精氨酸使平菇的現(xiàn)蕾天數和出菇周期顯著縮短，生物學效率顯著提高，加速了平菇子實體的形成，但是硒酸精氨酸使平菇的菇型趨于分散，菌蓋變小，菌柄變粗，影響了子實體的分化。
　　對第一潮期富硒平菇子實體各方面品質進行了分析:采用原子熒光法測定平菇子實體、蛋白和多糖中的硒含量，結果表明:平菇子實體的硒含量顯著增加并與栽培料的硒濃度線性正相關，菌蓋比菌柄的富硒能力強，硒在多糖中含量較低，在蛋白質中大量積累;氣相色譜結合質

3、譜(GC-MS)分析表明，平菇子實體的揮發(fā)性物質以醇類為主，富硒平菇子實體中的1-辛烯-3-醇的相對含量增加;采用凱氏定氮法對平菇子實體中的總蛋白含量進行了定量分析，結果表明:富硒平菇子實體的總蛋白含量與空白組沒有顯著差異;此外，以硒為活性中心的谷胱甘肽過氧化物酶的活性在富硒平菇子實體中沒有顯著變化。
　　通過雙向電泳結合質譜技術分析了硒酸精氨酸對平菇子實體蛋白表達的影響，并優(yōu)化了子實體全蛋白的提取方法，研究表明:三氯乙酸(TCA

4、)沉淀法對水溶性雜質的去除效果較好，凝膠整體背景較淺，橫縱條紋較少，蛋白點清晰，形狀均勻，點的邊緣比較光滑，對比度較好，適合平菇子實體全蛋白的提取分析;2D圖譜分析共發(fā)現(xiàn)51個表達差異顯著的蛋白點，其中17個蛋白點的表達量顯著增加，34個蛋白點的表達量顯著減少;采用MALDI-TOF-MS/MS技術對8個表達量顯著增加且重現(xiàn)性好的蛋白點進行了鑒定，共鑒定出3個差異表達蛋白點，其中一個功能未知(gi|270056453)，另外兩個分別是甲