富硒醋酸菌的篩選及其富硒特性研究.pdf

1、硒具有諸多對(duì)生物體有益的功能和作用已被得到廣泛的認(rèn)可。許多種硒制劑來(lái)源也不盡相同，且有研究表明，硒源的毒性為：硒代蛋氨酸＞亞硒酸鈉＞生物硒＞納米紅色元素硒，而且它們的功效排列恰好與之相反。有研究表明，醋酸桿菌（Acetobacter Balch）富集的硒很可能正是納米紅色元素硒。所以，醋酸桿菌制備的生物硒具有廣闊的發(fā)展前景，它的功效與作用將會(huì)受到世人的青睞和肯定。
　　首先對(duì)醋酸桿菌進(jìn)行耐硒篩選，采用梯度稀釋平板法并重復(fù)試驗(yàn)，得出

2、耐受亞硒酸鈉濃度最大可達(dá)135mg/L，耐硒代蛋氨酸最大為70mg/L。所以亞硒酸鈉是更合適的硒源。
　　采用Plackett-Burman設(shè)計(jì)法設(shè)計(jì)主要因素篩選試驗(yàn)，Minitab16破解版設(shè)計(jì)響應(yīng)面法試驗(yàn)，固定接種生物量比例法設(shè)計(jì)復(fù)合菌株富硒試驗(yàn)。采用透析、消化和氫化物火焰原子吸收法測(cè)定菌體當(dāng)中的硒含量。
　　主要因素篩選試驗(yàn)中，影響最終生物硒含量的九個(gè)因素的顯著性順序?yàn)椋簛單徕c添加量>培養(yǎng)時(shí)間>初始PH值>培養(yǎng)溫度>

3、乙醇添加量>葡萄糖添加量>裝液量>接種量>NaCl添加量。單因素試驗(yàn)中，醋酸桿菌合成生物硒含量隨著各因素的增加或上升，均大體呈現(xiàn)先增后降的趨勢(shì)，其中以分別以90mg/L天的培養(yǎng)時(shí)間，以30℃的培養(yǎng)溫度，以初始PH值6.5，獲得了生物硒含量最大值。響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)中，獲得合成生物硒的優(yōu)化條件為：加硒量（X1）為75.62mg/L，初始PH值（X2）為5.53，培養(yǎng)溫度（X3）為32.32℃，預(yù)測(cè)響應(yīng)值為212.604ug/L，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)測(cè)