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文檔簡介
1、目的:觀察整合素相關(guān)激酶(ILK)在博萊霉素致小鼠肺纖維化中的動態(tài)表達(dá),探討其在肺纖維化中與上皮-間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化(EMT)的關(guān)系。
方法:復(fù)制博萊霉素致小鼠肺纖維化模型。治療的第28天和40天處死動物取出肺組織,用蘇木精-伊紅(HE)和Masson-trichrome染色,分別觀察實(shí)驗(yàn)動物肺炎癥和纖維化的程度,以樣本堿水解法檢測肺組織中羥脯氨酸的量,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測ILK mRNA表達(dá)、免疫組化檢測
2、不同實(shí)驗(yàn)組小鼠ILK,并同時檢測間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和上皮細(xì)胞標(biāo)記物上皮鈣粘附素(E-Cad)的表達(dá)。
結(jié)果:組織學(xué)結(jié)果顯示小鼠肺組織膠原含量在第28天明顯增加,肺泡間隔增寬,炎性細(xì)胞浸潤。第40天達(dá)高峰,肺組織紊亂,羥脯氨酸測定動態(tài)增高。與正常對照組比較,肺纖維化組在28天和40天中ILK、α-SMA蛋白表達(dá)均增高(P<0.01),E-Cad的蛋白表達(dá)均降低(P<0.01)。RT-PCR結(jié)果顯
3、示肺纖維化組在28d和40d中ILK mRNA的表達(dá)顯著增高(P<0.01)。
結(jié)論:
1.本實(shí)驗(yàn)成功的運(yùn)用腹腔注射博萊霉素的方法建立的小鼠肺纖維化模型,纖維化的形成周期較長,更有利于模擬人類肺間質(zhì)纖維化的病情演變過程。
2.整合素相關(guān)激酶在小鼠肺纖維化組織中表達(dá)增高,提示ILK可能參與了肺纖維化的發(fā)病機(jī)制,對肺纖維化的發(fā)展起促進(jìn)作用。
3.E-Cad在小鼠肺纖維化組織中表達(dá)減少,
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