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1、目的:檢測(cè)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子前體(Pro-BDNF)及其受體P75NTR、Sortilin在大鼠急性心肌梗死后心肌的表達(dá)及變化過(guò)程。探討Pro-BDNF及其受體在大鼠急性心肌梗死中的作用。
方法:采用結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降之建立大鼠急性心肌(AMI)模型,SD(Sprague-Dawley)大鼠隨機(jī)分為Sham組(只穿線不結(jié)扎)6只,BSA組(術(shù)前30分鐘給予10ml/kg BSA)36只,分別于術(shù)后1h、6h、1d、3d、7
2、d、14d處死大鼠(每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只大鼠),取心肌標(biāo)本行免疫組化觀察Pro-BDNF及其受體P75NTR、Sortilin在急性心肌梗死后梗死區(qū)、非梗死區(qū)表達(dá)的變化,應(yīng)用Western Blot分析Pro-BDNF及其受體P75NTR、Sortilin在急性心肌梗死后分別在梗死區(qū)、邊緣區(qū)、遙遠(yuǎn)區(qū)的蛋白表達(dá)變化。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,多組資料之間的比較采用重復(fù)測(cè)量資料的方差
3、分析,組間比較采用(SNK),以P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:1.免疫組化顯示Sham組心肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞在梗死區(qū)、非梗死區(qū)均有微弱Pro-BDNF及其受體P75NTR、Sortilin陽(yáng)性表達(dá)。梗死區(qū)BSA組Pro-BDNF及Sortilin、P75NTR術(shù)后顯著陽(yáng)性表達(dá)。非梗死區(qū)BSA組Pro-BDNF及Sortilin在術(shù)后6h、1d可見顯著陽(yáng)性表達(dá),術(shù)后1h、3d、7d、14d均未見顯著陽(yáng)性表達(dá)。BSA組P
4、75NTR在非梗死區(qū)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均未見顯著陽(yáng)性表達(dá)。2.應(yīng)用Western Blot分析,以Tubulin作為內(nèi)參,均與Sham組相比,BSA組Pro-BDNF及Sortilin在心肌梗死區(qū)術(shù)后1h時(shí)表達(dá)開始上調(diào),術(shù)后6h顯著上調(diào),術(shù)后1d稍下降后繼續(xù)上調(diào),術(shù)后7d、14d穩(wěn)定在高表達(dá)。在邊緣區(qū)和遙遠(yuǎn)區(qū)BSA組Pro-BDNF及Sortilin術(shù)后1h微量表達(dá),術(shù)后6h開始表達(dá)上調(diào),術(shù)后1d表達(dá)顯著上調(diào),其后表達(dá)下降,術(shù)后3d、7d、14
5、d均僅見微量表達(dá)。BSA組P75NTR在梗死區(qū)術(shù)后1h、6h表達(dá)開始上調(diào),術(shù)后1d、3d顯著上調(diào),其后表達(dá)稍有所下降,術(shù)后7d、14仍可見明顯上調(diào)。但BSA組P75NTR在邊緣區(qū)和遙遠(yuǎn)區(qū)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均未見表達(dá)上調(diào)。
結(jié)論:1.Pro-BDNF及其受體P75NTR、Sortilin在正常心肌細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞中亦有分布。2.Pro-BDNF、Sortilin在心肌梗死區(qū)及非梗死區(qū)表達(dá)均增高,提示Pro-BDNF在大鼠急性心肌梗
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