白血病患者ETV6基因異常檢測(cè)及臨床意義.pdf

1、目的：
　　 1、檢測(cè)急慢性白血病病患者ETV6基因異常。
　　 2、探討ETV6基因異常在白血病的發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　 3、初步揭示ETV6基因異常與白血病患者的預(yù)后的關(guān)系。
　　 材料與方法：
　　 1、病例資料初診的急慢性白血病患者31例，其中急性白血病13例，慢性粒白血病12例，慢性淋巴細(xì)胞6例，全部符合2001年WHO的分型和診斷標(biāo)準(zhǔn)。男性14例，女性17例，中位年齡45歲（17歲-

2、76歲）。
　　 2、骨髓細(xì)胞培養(yǎng)及染色體制備取患者骨髓標(biāo)本，在無(wú)刺激條件下培養(yǎng)并收獲細(xì)胞，采用直接法和（或）短期培養(yǎng)法制備細(xì)胞染色體。
　　 3、傳統(tǒng)細(xì)胞遺傳學(xué)采用R顯帶技術(shù)對(duì)患者骨髓細(xì)胞進(jìn)行染色體分析。
　　 4、Split-signal FISH應(yīng)用分裂探針(RH77972和D12S922)對(duì)31例急慢性白血病患者染色體標(biāo)本進(jìn)行熒光原位雜交檢測(cè)其ETV6異常情況。
　　 5、FISH對(duì)檢測(cè)到ETV6

3、缺失的患者用12號(hào)染色體著絲粒探針進(jìn)一步行FISH檢測(cè)12號(hào)染色體情況。
　　 6、RT-PCR對(duì)涉及ETV6異常的急性早幼粒細(xì)胞白血病患者行RT-PCR檢測(cè)PML-RARa融合基因。
　　 結(jié)果：
　　 1、細(xì)胞遺傳學(xué)檢查31例患者發(fā)現(xiàn)12例存在染色體畸變，畸變率38.7％，其中涉及12號(hào)染色體畸變1例慢淋患者為12號(hào)三體，其它無(wú)涉及12號(hào)染色體異常。
　　 2、Split-signal FISH對(duì)31

4、例白血病患者染色體標(biāo)本進(jìn)行熒光原位雜交檢測(cè)其ETV6異常情況，在一例急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)患者檢測(cè)到ETV6缺失（部分或完全）。核型分析為正常核型。
　　 3、進(jìn)一步FISH用12號(hào)染色體著絲粒探針檢測(cè)該例存在ETV6缺失的APL患者的骨髓細(xì)胞均為2個(gè)信號(hào)。
　　 4、RT-PCR對(duì)該例存在ETV6缺失的患者進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)PML-RARa，凝膠電泳無(wú)產(chǎn)物，該患者PML-RARa融合基因陰性。
　　

5、結(jié)論：
　　 1、該例存在ETV6缺失的APL患者PML-RARa陰性，ETV6的缺失與APL的發(fā)病密切相關(guān)。
　　 2、該例患者APL成功治療緩解后發(fā)生治療相關(guān)的MDS(t-MDS)，伴有ETV6缺失的APL預(yù)后不良。
　　 3、國(guó)際首次報(bào)道伴有ETV6缺失PML-RARa融合基因陰性的APL患者，治療緩解后發(fā)生t-MDS。初步揭示APL的發(fā)生及其后來(lái)發(fā)生的t-MDS發(fā)病機(jī)制可能為ETV6的缺失使其抑癌活性喪失