中醫(yī)藥苦黃湯抗大鼠原位肝移植急性排斥的實(shí)驗(yàn)觀察.pdf

1、目的：
　　 建立穩(wěn)定的大鼠肝移植模型，并探討清熱解毒、活血化瘀復(fù)方中藥(苦黃湯)對(duì)大鼠原位肝移植急性排斥反應(yīng)(AR)的影響。
　　 方法：
　　 1、運(yùn)用改良的Kamada二袖套法實(shí)行大鼠原位肝移植手術(shù)(供受體均為SD大鼠)，術(shù)中采用袖套法對(duì)肝下下腔靜脈、門(mén)靜脈進(jìn)行吻合，而肝上下腔靜脈采用縫合法吻合，膽總管采用支架法進(jìn)行重建。
　　 2、以Wistar大鼠(80例)作為供體、SD大鼠(80例)作為受體，

2、建立大鼠原位肝移植AR模型80例，并將其隨機(jī)分為生理鹽水組(20例)、復(fù)方中藥組(20例)、環(huán)孢素A組(20例)、復(fù)方中藥加環(huán)孢素A組(20例)。
　　 3、給藥方法為灌胃給藥，給藥時(shí)間為術(shù)前第1天開(kāi)始至術(shù)后30天，2ml/次/d。生理鹽水組僅給予生理鹽水2ml/d，復(fù)方中藥組給予復(fù)方中藥2 ml/d，環(huán)孢素A組給予環(huán)孢素A10mg/kg/次/d，復(fù)方中藥加環(huán)孢素A組給予復(fù)方中藥1ml/次/d+環(huán)孢素A5mg/kg/次/d。

3、r>　　 4、各組模型大鼠于術(shù)后第1、3、5、7天分別經(jīng)尾靜脈取血，ELISA法檢測(cè)白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)的含量。
　　 5、術(shù)后第7天，每組各處死10只大鼠，取腔靜脈血檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的值，光鏡下觀察肝臟組織病理改變及計(jì)算排斥反應(yīng)活動(dòng)指數(shù)(RAI)。每組余下大鼠觀察生存期。
　　 結(jié)果：
　　 1、操作熟練之后的50例SD→SD大鼠原位肝移植手

4、術(shù)中，供體大鼠取肝臟手術(shù)時(shí)間為(34.44±3.25)min，供肝熱缺血時(shí)間均接近0～1min；受體大鼠肝移植手術(shù)時(shí)間為(49.07±4.93)min，無(wú)肝期(17.26±2.51)mino大鼠原位肝移植術(shù)后1天、1周的生存率分別為92％(46/50)、86%(43/50)。
　　 2、復(fù)方中藥、環(huán)孢素A、復(fù)方中藥加環(huán)孢素A組模型大鼠的存活時(shí)間分別為(14.0±1.4)d、(18.4±1.5)d、(27.8±2.0)d，與生理鹽

5、水組的存活時(shí)間(8.7±0.8)d比較差異具有顯著性(P<0.05)。
　　 3、在第1、3、5、7天同一時(shí)間點(diǎn)，復(fù)方中藥、環(huán)孢素A、復(fù)方中藥加環(huán)孢素A組大鼠外周血IL-2的含量與生理鹽水組大鼠的比較顯著地降低(P<0.05)。
　　 4、在第1、3、5、7天同一時(shí)間點(diǎn)，復(fù)方中藥、復(fù)方中藥加環(huán)孢素A組大鼠外周血IL-10的含量與生理鹽水組大鼠的比較顯著地升高(P<0.05)，而環(huán)孢素A組大鼠外周血IL-10的含量與生理鹽

6、水組大鼠的比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)。
　　 5、術(shù)后第7天，大鼠外周血AST值、ALT值在復(fù)方中藥組為(648.7±140.3、701.7±126.4)u/l、環(huán)孢素A組為(421.5±92.8、466.8±98.2)u/l、復(fù)方中藥加環(huán)孢索A組為(210.7±86.7、228.1±78.5)u/l與生理鹽水組(995.4±165.7、952.6±153.7)u/l比較顯著下降，其差異具有顯著性(P<0.05)，其中以復(fù)

7、方中藥加環(huán)孢素A組最為顯著。
　　 6、術(shù)后第7天，復(fù)方中藥組大鼠移植肝排斥反應(yīng)活動(dòng)指數(shù)(RAI)(5.43±0.41)、環(huán)孢素A組(4.90±0.42)、復(fù)方中藥加環(huán)孢索A組(3.39±0.36)，與生理鹽水組(7.84±0.61)比較顯著降低(P<0.05)，其中以復(fù)方中藥加環(huán)孢素A組最為顯著。
　　 結(jié)論：
　　 1、本研究建立的大鼠原位肝移植模型成功率高、方法簡(jiǎn)單、無(wú)需吻合肝動(dòng)脈。
　　 2、清熱