大鼠自體原位肝移植逆灌注對急性肺損傷的影響.pdf

1、目的：
　　1、探討大鼠自體原位肝移植下腔靜脈逆灌注和門靜脈順灌注動物模型的建立及應(yīng)用。
　　2、在大鼠自體原位肝移植逆灌注及順灌注模型的基礎(chǔ)上，探討兩者術(shù)后對急性肺損傷的影響。
　　方法：
　　1、實(shí)驗(yàn)一：SD大鼠隨機(jī)分成順灌注組、逆灌注組和假手術(shù)組。大鼠在阻斷門靜脈及肝上下腔靜脈、肝下下腔靜脈后，灌洗液采用經(jīng)門靜脈灌入、經(jīng)肝下下腔靜脈流出的方法灌洗肝臟，肝臟灌洗成土黃色后，再依次解除血管阻斷恢復(fù)肝臟血供，完成

2、自體肝臟在體原位肝移植。其中順灌注組解除血管阻斷時先開放門靜脈，使門靜脈血順行灌注肝臟后，再開放下腔靜脈；逆灌注組解除血管阻斷時先開放下腔靜脈，使下腔靜脈血逆行灌注肝臟后，再開放門靜脈；假手術(shù)組只分離出門靜脈、下腔靜脈，不阻斷血管和灌洗肝臟。建立模型，統(tǒng)計(jì)手術(shù)時間和存活率，術(shù)后12h、1天、3天、7天檢測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和總膽紅素（TB）含量，術(shù)后12 h、7天每組隨機(jī)抽取大鼠處死行肝臟病理檢查。
　

3、　2、實(shí)驗(yàn)二：SD大鼠隨機(jī)分成順灌注組、逆灌注組和假手術(shù)組。同實(shí)驗(yàn)一建立模型后，術(shù)后6h、12 h、24h每組隨機(jī)抽取大鼠處死，測定動脈血?dú)夥治?、肺干濕重比值、肺組織髓過氧化酶（MPO）活性、丙二醛（MDA）含量、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）含量及肺組織病理檢查。
　　3、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，統(tǒng)計(jì)方法采用單因素方差分析+SNK法、成組t檢驗(yàn)。P<0.05為差異

4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、大鼠自體原位肝移植逆灌注與順灌注模型的建立和觀察
　　逆灌注組、順灌注組和假手術(shù)組模型建立手術(shù)時間分別為（39.00±2.50）min、（39.50±2.00）min和（39.00±1.00）min，存活率分別為93.3％（14/15）、86.7%（13/15）和100%（15/15）。與假手術(shù)組比較：術(shù)后12 h、1天、3天逆灌注組和順灌注的 ALT、AS T、TB值顯著增高，差異

5、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，術(shù)后7天三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與順灌注組比較：術(shù)后12 h、1天逆灌注組的 ALT、AST、TB值均明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。組內(nèi)比較：順灌注組與逆灌注組術(shù)后12h的 ALT、AST、TB值均最高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。肝臟組織 HE染色：術(shù)后12h，順灌注組和逆灌注組均表現(xiàn)不同程度的肝細(xì)胞排列紊亂，形態(tài)不規(guī)則，水腫變性，肝竇擴(kuò)張，中央靜脈擴(kuò)張，匯管區(qū)小葉間靜

6、脈擴(kuò)張、淤血，炎癥細(xì)胞浸潤；假手術(shù)組未見明顯異常。術(shù)后7天各組均未見明顯異常。
　　2、大鼠自體原位肝移植逆灌注對急性肺損傷的影響
　　與順灌注組比較：逆灌注組術(shù)后6h、12h的PH值、PaO2、肺干濕重比值較高，而肺組織MPO活性、MDA含量較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；術(shù)后24 h兩組間在上述指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而肺組織TNF-α含量逆灌注組術(shù)后6h、12h、24h均顯著降低，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)

7、學(xué)意義(P<0.05)。肺臟組織HE染色：術(shù)后6h、12 h、24 h，逆灌注組、順灌注組均表現(xiàn)不同程度的肺泡結(jié)構(gòu)破壞，肺泡腔擴(kuò)張、肺泡融合，肺泡上皮增生、肥厚，肺泡間隔增厚，小靜脈、毛細(xì)血管充血、淤血，炎性細(xì)胞浸潤。其中術(shù)后6 h、12 h表現(xiàn)較重，而術(shù)后24 h較輕。同時顯示逆灌注組肺臟組織病理損傷表現(xiàn)較順灌注組輕。
　　結(jié)論：
　　1、經(jīng)門靜脈灌洗大鼠自體原位肝移植順灌注與逆灌注模型操作簡單、手術(shù)時間短、成功率高、術(shù)后