阿德福韋酯治療前后乙型肝炎病毒耐藥變異情況及與基因型相關(guān)性的研究.pdf

1、目的：觀察乙型肝炎病毒(HBV)不同基因型對阿德福韋酯(ADV)治療慢性乙型肝炎(CHB)患者療效的影響；并觀察rtA181V/T/rtN236T是否存在自然變異以及ADV誘發(fā)變異情況，并分析變異與HBV基因型的關(guān)系。
　　 方法：1.隨機選取符合HBVDNA≥105IU/ml(HBeAg陰性者為≥104IU/ml)；ALT≥2×ULN；首次應(yīng)用口服抗病毒藥物治療的CHB患者，并排除合并其它肝炎病毒感染、肝癌、自身免疫性疾病、糖

2、尿病、腎功能異常及近半年內(nèi)使用過免疫抑制劑者以及妊娠或哺乳期婦女，共入選CHB患者86例。所有入選患者口服ADV10mg/d，療程48周。2.ADV治療前、治療48周，分別采集患者空腹靜脈血，離心后抽取血清置于-80℃冰箱備用。3.提取血清中HBVDNA，根據(jù)HBVDNA Pre-S和S基因區(qū)保守序列設(shè)計引物經(jīng)巢式PCR(ntPCR)擴增，瓊脂糖凝膠電泳根據(jù)堿基對(bp)大小判斷A-F6種HBV基因型。4.ADV治療前、治療后12、24

3、、48周分別采用熒光定量PCR法檢測HBVDNA定量、全自動生化儀檢測ALT水平以及ELISA法檢測血清病毒學(xué)標(biāo)志物；觀察HBV不同基因型對ADV治療CHB患者療效的影響。5.治療結(jié)束后，選取全部治療有效但HBVDNA未轉(zhuǎn)陰的患者以及無效和出現(xiàn)病毒學(xué)突破的患者，對治療前、治療48周留取的血清標(biāo)本提取HBVDNA，采用ntPCR擴增HBV逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)區(qū)序列，用直接測序法觀察是否存在rtA181V/T/rtN236T變異，如有變異存在，

4、并分析變異與基因型的關(guān)系。
　　 結(jié)果：86例CHB患者中，26例(30.23％)為B基因型；54例(62.79％)為C基因型；6例(6.98％)為B+C型；治療前B、C基因型CHB患者HBVDNA、ALT水平以及HBeAg/HBeAb無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)，治療后12、24、48周HBVDNA有效抑制率、轉(zhuǎn)陰率、ALT復(fù)常率、HBeAg轉(zhuǎn)陰率、HBeAg/HBeAb轉(zhuǎn)換率無明顯差異(p＞0.05)，進一步證明B、C基因型

5、與ADV療效無顯著性差異。86例CHB患者治療48周后，其中有效72例，包括27例患者HBVDNA未轉(zhuǎn)陰，45例患者HBVDNA轉(zhuǎn)陰、9例無效，1例發(fā)生病毒學(xué)突破，所選取的CHB患者治療前及治療48周的血清標(biāo)本，進行PCR-DNA直接測序，結(jié)果顯示均未出現(xiàn)rtA181V/T/rtN236T變異。
　　 結(jié)論：本組資料研究顯示，ADV療效與B、C基因型無關(guān)系，且未發(fā)現(xiàn)rtA181V/T/rtN236T自然變異及ADV誘發(fā)變異，即8