新結(jié)構(gòu)GnRH拮抗類(lèi)似物L(fēng)XT-101抗前列腺癌藥理作用及作用機(jī)理的研究.pdf

1、前列腺癌是西方男性常見(jiàn)的惡性腫瘤，在美國(guó)其發(fā)病率位居男性惡性腫瘤的第一位，死亡率僅次于肺癌位居第二位。我國(guó)男性前列腺癌的發(fā)病率和死亡率雖遠(yuǎn)低于歐美國(guó)家，但近年來(lái)呈逐年上升趨勢(shì)，隨著我國(guó)老齡人口的不斷增加，預(yù)計(jì)在今后5～10年內(nèi)，前列腺癌將成為我國(guó)中老年男性的常見(jiàn)疾病，對(duì)我國(guó)男性的健康造成嚴(yán)重威脅。因此，前列腺癌的預(yù)防、診斷與治療日益成為不容忽視的全球性問(wèn)題，有關(guān)前列腺癌的基礎(chǔ)研究以及治療藥物的研發(fā)已成為當(dāng)前國(guó)際范圍內(nèi)的熱點(diǎn)之一。

2、 1941年，芝加哥大學(xué)的Huggins和Hodges發(fā)現(xiàn)約70％的前列腺癌具有雄激素依賴性，其后前列腺癌的內(nèi)分泌治療的研究廣泛開(kāi)展起來(lái)。早期的內(nèi)分泌治療主要是采用手術(shù)去勢(shì)的方法，該方法雖然療效顯著，但由于手術(shù)去勢(shì)導(dǎo)致性功能永久性喪失，副作用明顯，且對(duì)病人的心理和生理影響很大，因此，內(nèi)分泌治療藥物的研究和開(kāi)發(fā)得到了廣泛關(guān)注。目前，前列腺癌的內(nèi)分泌治療藥物主要包括雌激素類(lèi)、抗雄激素類(lèi)以及GnRH類(lèi)似物三種。雌激素類(lèi)和抗雄激素類(lèi)是最早用于治

3、療前列腺癌的內(nèi)分泌藥物，但前者有嚴(yán)重的心血管毒性，后者長(zhǎng)期應(yīng)用會(huì)引起嚴(yán)重的肝毒性和耐藥反應(yīng)，因而并非理想的內(nèi)分泌治療藥物。 GnRH類(lèi)似物是近二十年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一類(lèi)內(nèi)分泌治療藥物。其中GnRH激動(dòng)劑如亮丙瑞林已在臨床上廣泛應(yīng)用，而GnRH拮抗劑在近十年來(lái)剛剛發(fā)展起來(lái)。與激動(dòng)劑相比，GnRH拮抗劑具有療效確切、起效迅速且副作用小的特點(diǎn)，成為近年來(lái)內(nèi)分泌治療藥物的研發(fā)熱點(diǎn)。目前己上市的GnRH拮抗劑僅有Cetrorelix、Gani

4、relix和Abarelix三種，其中Cetrorelix和Ganirelix主要用于青春期性早熟和生殖輔助治療，只有Abarelix的適應(yīng)癥為進(jìn)展期前列腺癌。這三種GnRH拮抗劑的開(kāi)發(fā)上市為廣大的性激素依賴性疾病患者提供了更安全有效的治療手段，但還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)需要。 LXT-101是該所合成的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新型GnRH拈抗劑。該室前期研究結(jié)果表明，LXT-101單次皮下注射給藥4-8小時(shí)，可使大鼠血清睪酮水平降至去勢(shì)水

5、平，其效價(jià)強(qiáng)度及效能與Cetrorelix相當(dāng)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，LXT-101促組胺釋放的作用強(qiáng)度明顯低于Cetrorelix，提示其致過(guò)敏反應(yīng)的副作用小于Cetrorelix，具有良好的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用前景。在此基礎(chǔ)上，本研究首先對(duì)LXT-101抑制睪酮作用的量效和時(shí)效關(guān)系及其與垂體GnRH受體(GnRHreceptor，GnRH-R)作用的受體動(dòng)力學(xué)特性進(jìn)行了研究，進(jìn)而觀察了LXT-10l對(duì)荷人前列腺癌細(xì)胞LNCaP裸小鼠腫瘤生長(zhǎng)的影響，

6、旨在為將LXT-101開(kāi)發(fā)成一種新的抗前列腺癌藥物提供藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)，同時(shí)為選擇合理的劑型和臨床給藥方案提供參考。在此基礎(chǔ)上，為揭示LXT-101抗前列腺癌的其它藥理學(xué)特點(diǎn)及其機(jī)理，本研究以雄激素依賴的LNCaP和非雄激素依賴的DUl45兩種人前列腺癌細(xì)胞為模型，探討了LXT-101對(duì)人前列腺癌細(xì)胞增殖的直接作用及其可能的作用機(jī)理，并選擇幾種具有代表性的GnRH類(lèi)似物進(jìn)行了比較。 一、LXT-101對(duì)正常大鼠fill清睪酮水平及

7、性器官重量的影響 二、LXT1013,-I垂體GnRIt受體的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合 三、LXT-101對(duì)荷人前列腺癌裸小鼠腫瘤生長(zhǎng)及fill清睪酮和PSA的影響 四、LXT101體外應(yīng)用對(duì)人前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用及作用機(jī)理的研究 本論文主要得出以下結(jié)論： l、LXT-101能競(jìng)爭(zhēng)抑制[125I，D-Trp6]GnRH與垂體GnRH-R的特異性結(jié)合，是垂體GnRH-R的高親和力配體，結(jié)合LXT-101迅速降低血

8、清睪酮水平的作用特點(diǎn)進(jìn)行分析，可以判斷LXT-101為垂體GnRH-R的拮抗劑，競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合垂體GnRH-R是其迅速降低血清睪酮的主要作用機(jī)理。 2、LXT-101單次皮下注射能迅速降低正常大鼠血清睪酮至去勢(shì)水平，但作用的維持時(shí)間短；增加給藥頻率能明顯降低維持去勢(shì)所需的藥物劑量，采用持續(xù)給藥的方式則可使所需藥量進(jìn)一步降低。表明持續(xù)緩慢釋放的給藥方式能使LXT-101在更小劑量時(shí)迅速降低血清睪酮水平，并使之維持在去勢(shì)水平。 3

9、、LXT-lOl能抑制荷人前列腺癌細(xì)胞LNCaP裸小鼠腫瘤塵長(zhǎng)，提示LXT-10l可能對(duì)雄激素依賴的前列腺癌有治療作用：同時(shí)能明顯降低血清睪酮水平，表明競(jìng)爭(zhēng)性拮抗垂體GnRH-R從而降低血清睪酮水平是LXT-101抑制雄激素依賴性前列腺癌生長(zhǎng)的重要作用機(jī)理。 4、在低雄激素環(huán)境下，LXT-101體外應(yīng)用對(duì)雄激素依賴的LNCaP細(xì)胞增殖及PSA分泌具有明顯抑制作用，提示LXT-10l對(duì)雄激素依賴的前列腺癌細(xì)胞的增殖具有直接抑制作用

10、。 5、LXT-101能上調(diào)LNCaP細(xì)胞表達(dá)GnRH-R，抑制其表達(dá)EGF和IGF-1的mRNA，并下調(diào)ERK磷酸化，下調(diào)AR的表達(dá)，提示影響GnRH-R、多種細(xì)胞因子和AR三條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的交互作用可能是LXT．101抑制LNCaP細(xì)胞增殖的作用機(jī)理之一。 6、上述研究結(jié)果表明LXT-101能通過(guò)拮抗垂體GnRH-R從而降低血清睪酮分泌及直接抑制前列腺癌細(xì)胞增殖兩種途徑抑制雄激素依賴性前列腺癌的生長(zhǎng)，有望開(kāi)發(fā)成為新型