前列腺癌細(xì)胞裂解物致敏樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)特異抗瘤作用研究.pdf

1、研究目的：從小鼠骨髓前體細(xì)胞中分離、培養(yǎng)和擴(kuò)增樹突狀細(xì)胞(dendriticcell,DC)；研究DC發(fā)育、分化和成熟過程中形態(tài)學(xué)和免疫學(xué)的變化；RM-1前列腺癌細(xì)胞裂解物沖擊DC，構(gòu)建前列腺癌DC瘤苗，初步研究該瘤苗在小鼠體內(nèi)外抗前列腺癌作用。 研究方法：分離C57B1/6小鼠骨髓前體細(xì)胞，在GM—CSF和IL-4聯(lián)合作用促進(jìn)前體細(xì)胞向DC分化，大量制備DC。光鏡觀察DC形態(tài)學(xué)特征，混合淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、辣根過氧化物酶(HRP)吞

2、噬實(shí)驗(yàn)研究DC生物學(xué)特性。RM-1前列腺癌細(xì)胞裂解物產(chǎn)物致敏DC，酶聯(lián)免疫反應(yīng)(EL,ISA)法檢測致敏。DC培養(yǎng)液上清IL-12，檢測該瘤苗體外誘導(dǎo)特異性CTL，的殺傷作用。建立小鼠RM-1前列腺癌模型，觀察致敏DC瘤苗對荷瘤小鼠的治療作用。 結(jié)果：1．在GM-CSF或GM-CSF聯(lián)合IL-4誘導(dǎo)下，體外培養(yǎng)7天，可從小鼠骨髓前體細(xì)胞中獲得成熟DC，且GM-CSF聯(lián)合IL-組DC得率高。培養(yǎng)4天的DC為未成熟DC，突起少而短，

3、胞內(nèi)囊泡多，刺激T細(xì)胞增殖能力弱，吞噬能力強(qiáng)；培養(yǎng)7天的DC為成熟。DC，突起多而長，胞內(nèi)囊泡少，刺激T細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，吞噬能力弱。 2．體外試驗(yàn)顯示，RM-1腫瘤細(xì)胞裂解物致敏DC分泌IL-12能力強(qiáng)于DC(p<0.05)，用致敏DC免疫的小鼠，其脾臟T細(xì)胞經(jīng)RM-1細(xì)胞誘導(dǎo)后，對RM-1細(xì)胞具有特異性殺傷作用，同DC組比較差異有顯著性(p<0.05)。 3．致敏DC治療組的RM-1前列腺癌荷瘤小鼠腫瘤生長緩慢，生存期

4、延長同PBS組及DC組比較差異明顯(p<0.05)，PBS同DC組之間無顯著差異；且腫瘤壞死明顯，瘤體內(nèi)及腫瘤周圍有大量炎細(xì)胞浸潤。 結(jié)論：1．小鼠骨髓單核細(xì)胞在GM-CSF和IL-4誘導(dǎo)下可轉(zhuǎn)化為DC，且GM.CSF和IL.4的聯(lián)合應(yīng)用，能增加DC的得率。2．RM-1前列腺癌細(xì)胞裂解物致敏的DC能誘導(dǎo)T細(xì)胞對RM-1細(xì)胞產(chǎn)生特異性殺傷作用，且致敏DC能比DC分泌更多IL-12。 3．致敏DC回輸體內(nèi)，可起到免疫治療作用