海洋生物Ⅰ號(hào)抗鼻咽癌活性成分的提取及其作用機(jī)制的探討.pdf

1、　本文采用滲漉法，將打碎的新鮮海洋生物Ⅰ號(hào)先用95﹪的食用乙醇提取出較粗的成分A、繼而依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取分別得到三種不同的提取物B、C、D，然后用MTT法篩選出抗鼻咽癌作用最有效的活性成分(海洋生物Ⅰ號(hào)提取物C)。用以下方法研究海洋生物Ⅰ號(hào)提取物C對(duì)CNE-2Z細(xì)胞生長和分化的影響：①采用集落形成實(shí)驗(yàn)測(cè)定其對(duì)CNE-2Z細(xì)胞集落形成率的影響；②以細(xì)胞計(jì)數(shù)法觀察提取物C對(duì)CNE-2Z細(xì)胞生長曲線的影響；③流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)提取

2、物C對(duì)CNE-2Z細(xì)胞周期分布的影響；④TRAP-ELISA法檢測(cè)提取物C對(duì)CNE-2Z細(xì)胞端粒酶活性的影響；⑤RT-PCR法檢測(cè)提取物C對(duì)CNE-2Z細(xì)胞hTERT mRNA、hTR mRNA、COX-2 mRNA和VEGF mRNA表達(dá)的影響；⑥Western blot法檢測(cè)提取物C對(duì)CNE-2Z細(xì)胞c-Myc和P53表達(dá)的影響；⑦用免疫細(xì)胞化學(xué)涂片法檢測(cè)提取物C對(duì)CNE-2Z細(xì)胞PKCα表達(dá)的影響；⑧用免疫細(xì)胞化學(xué)爬片法檢測(cè)提取物