MRSA SCCmec分型及同患者多部位分離金黃色葡萄球菌的PFGE分析.pdf

1、金黃色葡萄球菌(金葡菌)是引起人類感染的常見病原菌,?？梢鹌つw軟組織感染、食物中毒、燙傷樣皮膚綜合征、中毒休克綜合征、人工裝置相關(guān)性感染、尿路感染、關(guān)節(jié)炎等,也可導(dǎo)致病情嚴(yán)重、危及生命的血流感染、心內(nèi)膜炎、心包炎、肺炎等。從上世紀(jì)后半葉開始,金葡菌尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)感染嚴(yán)重危害了人類的身體健康。MRSA的出現(xiàn)及傳播使感染的治

2、療更加困難和棘手?？焖?、準(zhǔn)確地檢測(cè)出MRSA,掌握流行規(guī)律對(duì)于控制MRSA所致的院內(nèi)感染,指導(dǎo)臨床醫(yī)師合理應(yīng)用抗生素具有重要意義。
　　 一、MRSA耐藥性分析
　　 目的:了解本市某三級(jí)甲等醫(yī)院2005年9月～2008年9月MRSA臨床分離株的耐藥情況。
　　 方法:1、收集天津市某三級(jí)甲等醫(yī)院門診及住院患者的血、痰、胸腹腔引流液、膿液及眼、耳、鼻等部位分泌物。細(xì)菌鑒定采用VITEK全自動(dòng)系統(tǒng)鑒定法及金黃色葡萄

3、球菌乳膠凝集法,MRSA篩選采用mecA基因擴(kuò)增法,其中甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)75株；MRSA79株。2、采用微量肉湯稀釋法及K-B紙片擴(kuò)散法測(cè)試MRSA對(duì)青霉素、苯唑西林、氨芐西林、環(huán)丙沙星、莫西沙星、頭孢唑林、氯霉素、林可霉素、慶大霉素、頭孢曲松、紅霉素、利福平、四環(huán)素、萬古霉素、替考拉寧、復(fù)方磺胺甲噁唑、利奈唑胺、替加環(huán)素共18種抗生素藥物的敏感性。3、誘導(dǎo)克林霉素耐藥的檢測(cè)采用克林霉素-紅霉素雙紙片誘導(dǎo)試驗(yàn)(D試

4、驗(yàn))。
　　 結(jié)果：79株MRSA臨床耐藥株對(duì)青霉素、苯唑西林、氨芐西林、頭孢曲松、環(huán)丙沙星完全耐藥,對(duì)氯霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑耐藥率相對(duì)較低,分別為3.80％、10.13％,對(duì)糖肽類抗生素萬古霉素、替考拉寧及利奈唑胺、替加環(huán)素均敏感。7株紅霉素耐藥、林可霉素敏感或中介的MRSAD試驗(yàn)均陽性。
　　 結(jié)論：MRSA具有多重耐藥的特點(diǎn),未發(fā)現(xiàn)萬古霉素、利奈唑胺、替加環(huán)素耐藥株,紅霉素耐藥、林可霉素敏感或中介的菌株存在誘導(dǎo)耐藥

5、現(xiàn)象。
　　 二、MRSA SCCmec分型
　　 目的:了解天津某醫(yī)院臨床分離MRSA葡萄球菌盒染色體mec(SCCmec)類型。
　　 方法：SCCmec分型采用多重PCR(M-PCR)法:對(duì)已知SCCmeeⅠ～Ⅴ型中的9個(gè)特異性區(qū)域擴(kuò)增。
　　 結(jié)果：SCCmec分型顯示79株受試MRSA均為SCCmecⅢ型。
　　 結(jié)論：天津某醫(yī)院臨床分離MRSA SCCmec基因型均為Ⅲ型。
　　

6、 三、同患者多部位分離金黃色葡萄球菌的PFGE分析
　　 目的:了解同一患者不同部位分離金葡菌的相關(guān)性。
　　 方法:11株金葡菌分別分離自5例金葡菌感染患者的血/痰/傷口分泌物、血/咽拭子、血/痰、血/痰、血/痰。脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)分析:限制性內(nèi)切酶SmaI酶切金葡菌基因組DNA后,進(jìn)行脈沖場(chǎng)凝膠電泳。
　　 結(jié)果：PFGE分析顯示,4組配對(duì)菌株酶切圖譜條帶數(shù)及條帶大小分別一致,為同一株菌,1組配對(duì)菌