中國(guó)實(shí)驗(yàn)小型豬肝細(xì)胞的低溫保存與復(fù)蘇培養(yǎng)的初步研究.pdf

1、隨著生物人工肝和相關(guān)學(xué)科研究的深入,迫切需要有效的肝細(xì)胞保存方法以適應(yīng)基礎(chǔ)和臨床研究的需要.低溫保存(hypothermic preservation)是目前保持肝細(xì)胞生物學(xué)活性的重要方法,可分為兩大類:一類為4℃左右短期保存;另一類為-80℃以下的超低溫長(zhǎng)期保存,亦即凍存(cryopreseryation).對(duì)凍存而言,國(guó)內(nèi)外多采用分階段降溫、快速?gòu)?fù)溫的方法,但對(duì)凍存保護(hù)劑(cryoprotective agent,CPA)的濃度、凍

2、存液的組成、細(xì)胞濃度及保存時(shí)間等報(bào)道不一.針對(duì)以上情況,該實(shí)驗(yàn)在4℃、-80℃和-196℃三種溫度下對(duì)影響豬肝細(xì)胞低溫保存的多種因素進(jìn)行了探討,包括低溫保存時(shí)細(xì)胞的合適濃度、保存時(shí)間的持久性、最佳DMSO濃度、低溫保存液的合理配制以及肝細(xì)胞復(fù)蘇后的培養(yǎng)等.實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果如下:一、豬肝細(xì)胞的4℃低溫保存二、豬肝細(xì)胞-80℃低溫凍存三、豬肝細(xì)胞-196℃超低溫凍存綜上所述,該研究探討了影響乳豬肝細(xì)胞低溫保存的因素,優(yōu)化了肝細(xì)胞低溫保存的條件