肌腱種子細(xì)胞深低溫保存的實(shí)驗(yàn)研究及組織工程化肌腱凍存初步探討.pdf

1、目的:探討組織工程肌腱種子細(xì)胞保存中檢測(cè)細(xì)胞存活率的方法.通過(guò)研究肌腱種子細(xì)胞深低溫保存過(guò)程中及保存前后等多個(gè)環(huán)節(jié)的影響因素對(duì)細(xì)胞存活率的影響,篩選抗凍保護(hù)劑、優(yōu)化凍存前后多個(gè)環(huán)節(jié)的影響因素以提高組織工程化肌腱種子細(xì)胞保存過(guò)程中的細(xì)胞存活率,為組織工程化肌腱保存作好準(zhǔn)備.最后對(duì)組織工程化肌腱保存作初步嘗試.結(jié)論:1.PI和Ho熒光染色后流式細(xì)胞儀分析及熒光攝影是種子細(xì)胞保存過(guò)程中細(xì)胞存活率研究的較好的方法.但要求細(xì)胞達(dá)到一定數(shù)量.2.凍

2、存后使用與培養(yǎng)時(shí)不同的營(yíng)養(yǎng)血清處理對(duì)細(xì)胞有損害,可降低細(xì)胞存活率.3.二甲基亞砜是肌腱種子細(xì)胞深低溫保存中比較好的抗凍保護(hù)劑.34.在冷凍保存過(guò)程中,細(xì)胞存活率與細(xì)胞濃度有一定關(guān)系,濃度太低可能降低細(xì)胞存活率.5.細(xì)胞在冷凍保存時(shí),降溫速度對(duì)細(xì)胞存活率有影響,慢速的分步降溫組細(xì)胞存活率明顯高于直接入液氮的快速降溫組.6.采用10﹪二甲基亞砜加15﹪小牛血清加75﹪DMEM配方保存肌腱種子細(xì)胞,對(duì)其分泌膠原功能無(wú)明顯影響.7.10﹪二甲基