肝星狀細(xì)胞與肝細(xì)胞微載體共培養(yǎng)對肝細(xì)胞生物學(xué)特性影響的實驗研究.pdf

1、目的:對微載體貼附懸浮共培養(yǎng)的原代大鼠肝細(xì)胞的生物學(xué)功能進(jìn)行評價，探討微載體貼附懸浮共培養(yǎng)對原代肝細(xì)胞功能特性的影響。 方法:應(yīng)用半原位膠原酶灌注法分離獲得原代大鼠肝細(xì)胞，與肝星狀細(xì)胞株rHSC-99加入含cytodex.3的DMEM培養(yǎng)液中混合共培養(yǎng)，定期檢測肝功能指標(biāo)，并動態(tài)觀察肝細(xì)胞形態(tài)變化。 結(jié)果:各培養(yǎng)組的細(xì)胞量、肝細(xì)胞的白蛋白及尿素合成量、安定轉(zhuǎn)化量在培養(yǎng)過程中均為先升高后逐漸下降，第4天最高；培養(yǎng)第4天起，

2、微載體共培養(yǎng)組(D組)活細(xì)胞量高于單層共培養(yǎng)組(B組)，微載體單培養(yǎng)組(C組)高于單層單培養(yǎng)組(A組)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義：蛋白及尿素合成量、安定轉(zhuǎn)化量，在培養(yǎng)第4～8天，D組高于B、C兩組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；培養(yǎng)第4天起，A組白蛋白及尿素合成量、安定轉(zhuǎn)化量均低于B組、C組、D組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；培養(yǎng)第4天細(xì)胞總RNA豐度各組均較高，且D組高于B組，C組高于A組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。光鏡下見肝細(xì)胞正常形態(tài)A組維持時間1約O天，B、C、D三