移植血管低溫-深低溫保存的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、前言
　　 近20年來(lái),血管移植在治療血管源性疾病及器官移植的循環(huán)重建中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,臨床上對(duì)血管替代物的需求也越來(lái)越多,按照來(lái)源這些血管替代物可分為3類:自體血管,人造血管和同種異體血管。同種異體血管,在理論上具有結(jié)構(gòu)相同、取材方便、管徑匹配等優(yōu)點(diǎn),可隨器官供體大量獲取。隨著組織保存技術(shù)的進(jìn)步,人們對(duì)異體血管的使用逐漸增多。
　　 異體血管現(xiàn)有的保存方法有深低溫凍存、低溫冷保存法(0-4℃)和戊二醛保存,前兩種

2、方法較為常用。低溫冷保存法具有簡(jiǎn)便易行、設(shè)備和條件要求不高等優(yōu)點(diǎn),但是其保存時(shí)限短,相關(guān)的研究較少；深低溫保存法長(zhǎng)期保存效果好,但是操作相對(duì)復(fù)雜、成本及設(shè)備要求較高。另外,目前尚無(wú)統(tǒng)一、公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)判定復(fù)溫后血管的活力。在臨床實(shí)踐中,由于各種因素,己行4℃保存的移植血管在短期內(nèi)可能仍得不到使用,此時(shí)的血管能否再行深低溫保存,從而延長(zhǎng)血管的保存時(shí)間?本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察低溫及深低溫保存后移植血管的細(xì)胞代謝活性及組織結(jié)構(gòu)變化情況,探討4℃ UW液

3、冷保存移植血管的效果及時(shí)限,-80℃深低溫保存血管的效果及低溫-深低溫序貫保存移植血管的可行性與安全時(shí)限。
　　 目的
　　 通過(guò)觀察低溫及深低溫保存后移植血管的細(xì)胞代謝活性及組織結(jié)構(gòu)變化情況,探討4℃UW液保存移植血管的效果及時(shí)限、-80℃深低溫保存血管的效果及低溫-深低溫序貫保存移植血管的可行性與安全時(shí)限。
　　 材料及方法
　　 取人的髂動(dòng)脈、脾動(dòng)脈于4℃UW液中保存72小時(shí)、1周、2周、3周、4周

4、,得到的血管一部分進(jìn)行氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)染色,光鏡及透射電鏡觀察。另一部分血管于-80℃冰箱中繼續(xù)保存4周,復(fù)溫后行NBT染色、光鏡及電鏡檢查。
　　 結(jié)果
　　 4℃UW液保存2周以內(nèi)的動(dòng)脈NBT染色時(shí)間與新鮮組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,4℃UW液保存1周以內(nèi)的動(dòng)脈再行-80℃保存,其NBT染色時(shí)間與新鮮凍存組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,4℃保存1周以內(nèi)的血管行-80℃深低溫保存前后的NBT染色時(shí)間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；隨著4℃低溫保存時(shí)間的延