川陳皮素對高糖誘導人臍靜脈內皮細胞損傷的保護作用.pdf

1、目的:
　　 近年來,糖尿病(DM)發(fā)病率和死亡率日益升高,其中心血管并發(fā)癥是導致DM患者死亡的主要原因之一。DM導致心血管疾病的機制是復雜的,其中血管內皮功能紊亂是發(fā)生心血管并發(fā)癥的重要因素。因此,如何保護血管內皮成為對抗DM心血管并發(fā)癥的新的研究靶點。川陳皮素是從橘皮中提取得到的一種黃酮類化合物,具有抗血細胞凝集、抗血栓形成、抗真菌、抗炎、抗過敏、抗癲癇等功效。但是,川陳皮素能否對抗高糖誘導下的內皮細胞損傷,目前國內外未見相

2、關研究。
　　 本實驗通過體外高糖誘導人臍靜脈內皮細胞(Human Umbilical VascularEndothelial Cells,HUVEC)建立高糖損傷內皮細胞模型,探討川陳皮素對高糖誘導內皮細胞損傷的保護作用。
　　 方法:
　　 本實驗所用人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)由山東大學附屬山東省立醫(yī)院中心實驗室提供,選擇生長良好的HUVECs用于試驗。試驗分組為:①正常對照組:用含有10％胎牛血清的R

3、PMI-1640完全培養(yǎng)液和終濃度為5.5 mmol/L的葡萄糖,與內皮細胞共同培養(yǎng)48h;②高糖組(HG):用含有10％胎牛血清的RPMI-1640完全培養(yǎng)液和終濃度為30mmol/L的葡萄糖,與內皮細胞共同培養(yǎng)48h;③高糖+川陳皮素組:用含有不同終濃度的川陳皮素(40μ mol/L、20μ mol/L、10μmol/L、5μ mol/L、2.5μmol/L,分別為標為A組、B組、C組、D組、E組)和內皮細胞預處理18h,然后加入終

4、濃度為30mmol/L的葡萄糖,繼續(xù)培養(yǎng)48h。在倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài),進行MTT光吸收檢測法檢測內皮細胞活力,細胞上清液中SOD活性和NO分泌量測定。所得數據采用SPSS18.0軟件進行統計分析。
　　 結果:
　　 1.HUVECs細胞形態(tài)學變化
　　 正常對照組細胞生長狀態(tài)良好,貼壁牢,細胞間連接緊密,細胞呈多角形或是梭形,邊界清,大小均勻,胞漿豐富,呈單層鋪路石樣排列。高糖組細胞皺縮,變圓,細胞體

5、積變小,細胞間隙增大,邊界不清,并有較多細胞脫落。高劑量川陳皮素組(A組、B組、C組)與高糖組細胞相比,細胞形態(tài)有不同程度的改善,細胞間隙減小,胞間連接增多,大部分細胞恢復呈多角形或梭形。低劑量川陳皮素組(D組、E組)與高糖組比較,細胞形態(tài)改善不明顯,細胞體積變小,胞間連接減少,邊界不清,有較多細胞脫落。
　　 2.川陳皮素對高糖誘導HUVEC損傷的保護作用
　　 與正常對照組相比,高糖組HUVEC細胞活力(OD值)、總

6、SOD活力和NO分泌量明顯下降(P均＜0.01),而與高糖組相比,經不同濃度的川陳皮素作用后,HUVEC細胞活力(OD值)、總SOD活力和NO分泌量明顯回升,并與川陳皮素呈濃度依賴性。其中高濃度川陳皮素組(A組、B組、C組)與高糖組比較有統計學意義(P＜0.01),而低濃度川陳皮素組(D組、E組)與無統計學意義(P＞0.05),。
　　 結論:
　　 1.高糖可誘導HUVEC活力下降,活性氧產生增多,抗氧化能力降低,導致