白藜蘆醇對高糖致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：探討白藜蘆醇(Resveratrol，Res)對高糖環(huán)境人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。 方法：人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(ECV304)體外培養(yǎng)24h貼壁后隨機(jī)分為正常對照(NG，葡萄糖濃度5.6mmol/L)組、高糖(HG，葡萄糖濃度30mmol/L)組，白藜蘆醇(NG+Res10-3mol/L-10-5mol/L)組、高糖+白藜蘆醇(HG+Res10-3mol/L-10-5mol/L)組。NG組、HG組培養(yǎng)24、48和7

2、2h檢測細(xì)胞增殖，培養(yǎng)液中一氧化氮(NO)，內(nèi)皮素-1(ET-1)，細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)濃度；NG+Res10-3mol/L-10-5mol/L組和HG+Res10-3mol/L-10-5mol/L組培養(yǎng)48h檢測細(xì)胞增殖、NO濃度；HG+Res10-4mol/L組培養(yǎng)48h檢測ET-1、ICAM-1濃度。NG組、HG組、HG+Res10-4mol/L組48h檢測人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞胞漿中超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力

3、(TAC)、一氧化氮合酶(NOS)、可誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、丙二醛(MDA)的含量，用RT-PCR法檢測NF-κB65和iNOS mRNA表達(dá)，Western-blot法檢測NF-κB 65蛋白質(zhì)表達(dá)。 結(jié)果： 1.與NG組比較，HG組48h，72hMTT值明顯減低(P<0.01，P<0.05)，NG+Res各組與NG組MTT值相近，HG+Res10-4mol/L-10-5mol/L組MTT值高于HG組(P<0.01)

4、，低于NG和NG+Res10-4mol/L-10-5mol/L組，HG+Res10-4mol/L組MTT值高于HG+Res10-5mol/L。2.HG組比NG組NO、ET-1、ICAM-1明顯升高(P<0.05，P<0.01，P<0.01)，HG+Res組較HG組均顯著下降(P<0.01)，ET-1接近NG組，ICAM-1仍高于NG組(P＜0.01)。3.與NG組比較，HG組SOD活性，TAC能力明顯降低(P＜0.01)，MDA升高(P

5、<0.05)；HG+Res組明顯升高SOD活性和TAC能力升高(P<0.05)，降低MDA(P<0.01)，SOD，TAC仍低于NG組(P<0.05)，MDA接近NG組。4.與NG組比較，HG組NOS、iNOS、eNOS升高(P<0.01，P<0.05，P<0.01)，HG+Res組明顯降低NOS、iNOS、eNOS降低(P<0.01，P<0.05，P<0.01)，NOS，eNOS接近NG組，iNOS高于NG組(p<0.05)。5.HG

6、組上調(diào)NF-κB65 mRNA和蛋自質(zhì)表達(dá)，iNOSmRNA表達(dá)(P<0.01)，HG+Res組能下調(diào)兩者表達(dá)(P<0.01)，仍高于NG組(P<0.05)。用Spearman相關(guān)性分析NF-kB65與iNOSmRNA表達(dá)變化呈正相關(guān)(r=0.554，P<0.01)；NF-kB65與ICAM-1正相關(guān)(r=0.356，P<0.01)。 結(jié)論 1.白藜蘆醇可以改善高葡萄糖抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖作用，對正常內(nèi)皮細(xì)胞無促增殖作用。