人胎兒卵巢裸鼠體內埋植的實驗研究.pdf

1、目的：將冷凍前后及培養(yǎng)前后人胎兒卵巢組織埋植入去勢BALB/c-nu/nu裸鼠體內，通過觀察受體陰道脫落細胞的變化、埋植卵巢及受體子宮內膜的組織學改變、受體血清雌二醇水平，判斷胎兒卵巢組織埋植后的存活、生長及功能狀況。探討人胎兒卵巢移植的效果及可行性，為臨床胎兒卵巢移植治療卵巢早衰等內源性雌激素缺乏性疾病提供動物實驗依掘。 方法：選取4～6周齡健康雌性BALB/c裸鼠為實驗對象。隨機分為以下6組：O組為正常對照組(僅行背部皮膚

2、、筋膜、肌層切開縫合)；A組為去勢對照組(行雙側卵巢切除)；B組為新鮮胎兒卵巢埋植組(去勢后皮下埋植新鮮人胎兒卵巢)；C組為凍融胎兒卵巢埋植組(去勢后皮下埋植凍存復蘇后的人胎兒卵巢)；D組為新鮮胎兒卵巢培養(yǎng)后埋植組(去勢后皮下埋植體外培養(yǎng)后的新鮮胎兒卵巢)；E組為凍融胎兒卵巢培養(yǎng)后埋植組(去勢后皮下埋植體外培養(yǎng)后的凍融胎兒卵巢)。供體選取胎齡為20～28周韻人胎兒卵巢20例。觀察胎兒卵巢卵泡發(fā)育情況、裸鼠陰道脫落細胞變化、裸鼠子宮內膜的

3、組織學形態(tài)及血清雌二醇(E<,2>)水平，判斷胎兒卵巢在裸鼠體內的生長發(fā)育及功能狀況。 結果：1.陰道脫落細胞變化 O組呈正常動情周期變化；A組1周內角化上皮逐漸減少，出現大量未成熟有核上皮細胞，呈現雌激素缺乏狀態(tài)。在埋植3周后B組、C組、D組及E組裸鼠陰道脫落細胞涂片顯示逐漸增多的鱗片狀無核角化上皮細胞，角化上皮超過總數的50％，提示有雌激素的作用；在埋植6周內共有5只裸鼠恢復了動情周期。2.裸鼠血清雌二醇(E<,2>)的水

4、平A組血清E<,2>水平明顯低于O組，兩者差異顯著(P<0.001)；B組、C組、D組、E組血清E<,2>水平均明顯高于A組，差異有顯著性(P<0.001)；B組、C組、D組、E組血清E2水平與o組比較，均無顯著性差異(P>0.05)；相同埋植時間內B組與C組血清E2水平無顯著性差異(P>0.05)；D組血清E2水平與B組無顯著性差異(P>0.05)，E組血清E<,2>水平高于C組，差異有顯著性(P<0.001)。3．埋植卵巢的組織學

5、觀察 與未埋植的胎兒卵巢組織相比，埋植后胎兒卵巢內原始卵泡的比例顯著下降(P<0.05)，初級卵泡與次級卵泡的比例顯著上升(P<0.001)；原始卵泡進一步發(fā)育，表現為卵母細胞體積增大，扁平的顆粒細胞體積增大變高，向立方形細胞過渡，顆粒細胞數量增多，組織內可見豐富的血管網，埋植組織未見明顯的淋巴細胞浸潤現象。 4．子宮內膜腺體的組織學觀察與O組比較A組子宮內膜明顯變薄，腺體萎縮，少而短，B組、C組、D組、E組子宮內膜呈不同程度

6、的增生，腺體明顯增多增長，腺腔增大。 結論：1．人胎兒卵巢組織埋植入去勢裸鼠體內后，能夠重新建立血液供應在異體內存活，并且具有分泌雌激素的能力，可以作為移植的供體。2．人胎兒卵巢組織埋植入去勢裸鼠體內后，原始卵泡進一步發(fā)育，初級卵泡和次級卵泡的比例上升，去勢鼠體內雌激素水平升高，說明生長期卵泡是去勢鼠體內E<,2>的主要來源。3．冷凍不影響人胎兒卵巢的移植效果，說明胎兒卵巢能耐受凍融過程，為人胎兒卵巢庫的建立提供了依據。4．部分