迷迭香葉非精油組分清除自由基、抗氧化及抗人肝細(xì)胞HL7702氧化損傷作用的研究.pdf

1、現(xiàn)代研究表明，許多人類(lèi)疾病如心腦血管疾病、腫瘤、早老性癡呆、退行性疾病、組織損傷炎癥和衰老等，其過(guò)程中都有自由基的參與。實(shí)驗(yàn)證明，只要在自由基反應(yīng)中加入少量自由基清除劑或抑制劑，就能減輕或消除自由基的損害。長(zhǎng)期以來(lái)，人們一直使用合成抗氧化劑，但因其具有較多的毒副作用，所以人們將研究重點(diǎn)轉(zhuǎn)向了低毒高效的天然抗氧化劑，特別是從芳香植物中提取抗氧化劑成為了研究的熱點(diǎn)。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)芳香植物的精油含量及組分研究較多，而對(duì)芳香植物的非精油組分的清除

2、自由基、抗氧化作用及對(duì)細(xì)胞的抗氧化損傷的保護(hù)作用研究較少。
　　 本研究采用滬產(chǎn)迷迭香的干燥葉片作為實(shí)驗(yàn)材料，提取精油后，分別以水、乙醇和乙酸乙酯為溶劑，提取迷迭香葉的非精油組分，然后用超氧陰離子自由基(0)、羥自由基(OH)、過(guò)氧亞硝基(ONOO)、過(guò)氧化氫(H0)、碳酸自由基(C03)和OH氧化損傷DNA的化學(xué)發(fā)光體系，脂質(zhì)過(guò)氧化和二苯代苦味肼基自由基(DPPH)比色體系，檢測(cè)3種不同溶劑提取物對(duì)自由基的清除作用和抗氧化作用

3、，并通過(guò)計(jì)算IC比較三者的作用效果。再以人的正常肝細(xì)胞株HL7702為實(shí)驗(yàn)材料，檢測(cè)迷迭香葉非精油組分水提取物和乙醇提取物在H0脅迫下對(duì)HL7702的還原型谷胱苷肽(GSH)、丙二醛(MDA)和過(guò)氧亞硝基(ONOO)濃度的影響，并通過(guò)MTT法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)迷迭香葉水提取物和乙醇提取物對(duì)H0脅迫下的HL7702細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)和周期的影響。
　　 清除自由基和抗氧化實(shí)驗(yàn)表明：迷迭香葉非精油組分3種不同溶劑提取物均能有效清除02、OH

4、、H0、C03、ON00和DPPH，減輕自由基對(duì)DNA的氧化損傷，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化，且作用效果呈劑量依賴關(guān)系，即提取物濃度越大，清除自由基和抗氧化的效果越好。其中水提取物抑制自由基對(duì)DNA的氧化損傷和脂質(zhì)過(guò)氧化能力較強(qiáng)，其抑制化學(xué)發(fā)光50％時(shí)的樣品質(zhì)量濃度(IC)分別為32.3和36.11ug/mL;乙醇提取物清除02、ONOO和C0的效果較佳，IC分別為189.19、1.67和84.69ug/mL;乙酸乙酯提取物清除OH、H0和DPPH

5、的效果較好，IC分別為4.12、1.92和49.55ug/mL。
　　 細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)表明：迷迭香葉非精油組分水提取物和乙醇提取物均能在低濃度下對(duì)H0脅迫下的HL7702產(chǎn)生一定的保護(hù)作用并影響其細(xì)胞周期，并且可在一定程度上提高受損細(xì)胞內(nèi)GSH的含量，抑制受損細(xì)胞內(nèi)MDA和ONOO的產(chǎn)生。由此可知，迷迭香葉非精油組分水提取物和乙醇提取物均有提高受損HL7702內(nèi)抗氧化劑含量和清除自由基的作用，提示迷迭香葉提取物可能具有減輕和預(yù)防與自