Compound K誘導(dǎo)卵巢癌CAOV3細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、目的：本文通過研究CK在卵巢癌細(xì)胞中的作用，闡述其作用機(jī)制，為日后臨床化療藥物的研發(fā)及應(yīng)用提供理論指導(dǎo)。
　　方法：1、應(yīng)用MTT方法檢測CK抑制卵巢癌細(xì)胞CAOV3增殖的作用，并測定其半數(shù)抑制濃度IC50值；
　　2、利用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；
　　3、應(yīng)用免疫印跡分析法（Weston blot方法）檢測Caspase-3特異性底物PARP的斷裂情況；
　　4、體外檢測酶活結(jié)果測定細(xì)胞凋亡關(guān)鍵酶Casp

2、ase-3，Caspase-8，Caspase-9的活性。
　　結(jié)果：1、CK顯著抑制卵巢癌細(xì)胞 CAOV3增殖，并呈量-效關(guān)系，其半數(shù)抑制濃度IC50值為3.6μg/ml。
　　2、加入CK誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞CAOV3在熒光顯微鏡下出現(xiàn)了細(xì)胞凋亡特有的形態(tài)特征，如細(xì)胞變圓、膜發(fā)泡、細(xì)胞核固縮和斷裂。
　　3、通過免疫印跡法分析發(fā)現(xiàn)，CK的作用濃度為2.5μg/ml、5μg/ml時(shí)，Caspase-3特異性底物PARP發(fā)

3、生明顯斷裂,5μg/ml為甚。
　　4、Caspase活性檢測方法檢測到Caspase-3，Caspase-8，Caspase-9被激活，說明 CK通過Caspase-8激活的膜受體途徑和Caspase-9激活的線粒體途徑來完成細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)論：1、CK對人卵巢癌細(xì)胞CAOV3具有細(xì)胞毒性作用；
　　2、這種作用是通過細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)的；
　　3、細(xì)胞凋亡包括Caspase-8激活的膜受體途徑和Caspase-9