人參皂苷-Rh2誘導(dǎo)卵巢癌CAOV3細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、目的：卵巢惡性腫瘤嚴(yán)重威脅女性的健康，現(xiàn)已成為死亡率位于第三位的婦科惡性腫瘤。目前的治療方法還是以手術(shù)和輔助化療為主,但患者生存率未見(jiàn)明顯改善。研究發(fā)現(xiàn)人參皂苷-Rh2（Ginsenoside-Rh2，G-Rh2）對(duì)多種腫瘤細(xì)胞均有抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)凋亡的作用。但其在卵巢癌中的作用及其機(jī)制研究尚不清楚。本論文對(duì)G-Rh2在卵巢癌CAOV3細(xì)胞中的作用進(jìn)行了研究，并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行了初步的探索。
　　方法：1.應(yīng)用MTT方法檢測(cè)G-

2、Rh2對(duì)卵巢癌CAOV3細(xì)胞是否具有毒性，并測(cè)定其IC50值；2.熒光染色法進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察；3.采用流式細(xì)胞儀分析驗(yàn)證是否存在細(xì)胞凋亡；4.應(yīng)用Weston blot方法檢測(cè)Caspase-3特異性底物PARP的斷裂情況；5.體外分析凋亡細(xì)胞關(guān)鍵酶Caspase-3，-9的活性。
　　結(jié)果：1.G-Rh2對(duì)卵巢癌CAOV3細(xì)胞有抑制增殖的作用，且呈明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系，其IC50值為3.12ug/mL；2.在熒光顯微鏡下觀察到在

3、G-Rh2誘導(dǎo)的卵巢癌CAOV3細(xì)胞中出現(xiàn)了細(xì)胞變圓、膜發(fā)泡、細(xì)胞核固縮斷裂等細(xì)胞凋亡特有形態(tài)學(xué)變化；3.經(jīng)過(guò)流式細(xì)胞儀（Annexin-V-PI復(fù)染法）分析檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，G-Rh2作用24h后，CAOV3細(xì)胞早期凋亡和晚期凋亡的百分率分別為36.60％和26.47%，較對(duì)照組的1.59%和0.03%明顯增多；4.免疫印跡法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，藥物作用12h開(kāi)始，Caspase-3特異性底物PARP發(fā)生明顯斷裂；5.Caspase活性檢測(cè)方法檢測(cè)到C