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文檔簡介
1、目的:觀察金雀異黃素(genistein)衍生物5,4’-二-正辛烷氧基-7-二氟亞甲基異黃酮5,4’-Di-n-octoxyl-7-gem-difluoromethylenegenistein(DOdFMG)誘導人卵巢癌細胞系CoC1細胞生長抑制和凋亡作用。 方法:MTT比色法檢測不同濃度DOdFMG(0.3-30 μmol/L)對CoC1細胞系細胞增殖抑制作用。細胞計數(shù)法測定細胞存活率,繪制細胞生長曲線。AO/EB染色熒光顯
2、微鏡觀察DOdFMG誘導CoC1細胞凋亡作用。Western blot分析DOdFMG對CoC1細胞NF-κB、 Bcl-2、Bax蛋白表達和活性的影響。 結(jié)果: MTT比色法測定結(jié)果顯示:DOdFMG(3.0、10.0、30.0μM)處理CoC1細胞48小時,其細胞增殖相對抑制率分別為39.1%,47.7%,59.1%,呈濃度依賴性,其半數(shù)抑制濃度(IC50值)是11.9μM 。DOdFMG(30.0μM)的相對抑制率(59.
3、1%)較Genistein(30.0μM)的相對抑制率高(53.4%)。細胞計數(shù)法測定結(jié)果表明: DOdFMG(10.0μM)使CoC1細胞群體倍增時間從37.8小時(溶媒對照組)延長到50.6小時。AO/EB染色熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)DOdFMG(3.0、10.0、30.0μM)作用48小時后,均有部分凋亡呈現(xiàn)凋亡細胞形態(tài)特征,凋亡細胞數(shù)目隨藥物濃度的升高而依次增加,DOdFMG(30.0μM)較30μM的先導化合物即Genistein的
4、凋亡指數(shù)高。Western blot分析結(jié)果顯示0.3,3.0,30.0μM的DOdFMG處理CoC1細胞24小時后與對照組比較NF-κB(p65)、 Bcl-2蛋白表達分別下調(diào)6.83%、21.7%、38.3% ,11.6%、25.4%、46.2%,而Bax蛋白表達上調(diào)16.5%、37.6%、82.7%。 結(jié)論: 1)DOdFMG具有抑制體外培養(yǎng)人卵巢癌細胞系CoC1細胞增殖和生長作用,呈濃度依賴性。 2)DO
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