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文檔簡介
1、目的:
探索高濃度抗壞血酸對體外培養(yǎng)的人卵巢癌SK-OV3細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其可能的作用機(jī)制。
方法:
選擇人卵巢癌SK-OV3細(xì)胞作為實(shí)驗對象,分為對照組和實(shí)驗組(即高濃度抗壞血酸處理組)。CCK-8檢測不同濃度的抗壞血酸對體外培養(yǎng)的 SK-OV3細(xì)胞生長增殖的影響。5 mM抗壞血酸處理SK-OV3細(xì)胞后,Annexin V-FITC/PI雙染試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率;Hoechst332
2、58細(xì)胞核染色熒光顯微鏡下檢測細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;JC-1染色試劑盒染色流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞線粒體膜電位的變化;DCFH-DA染色熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)活性氧的表達(dá)水平;蛋白印跡法檢測Cytochrome C和Cleaved-capase3蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:
與對照組相比,實(shí)驗組卵巢癌SK-OV3細(xì)胞增殖受到抑制;并且在一定的濃度范圍內(nèi),隨抗壞血酸濃度增高,其對卵巢癌SK-OV3細(xì)胞增殖的抑制作用增強(qiáng)(P<0.05
3、)。5 mM抗壞血酸處理后,SK-OV3細(xì)胞的凋亡率明顯高于對照組(P<0.05);與對照組相比,抗壞血酸處理組 SK-OV3細(xì)胞核明顯固縮、碎裂,可見凋亡小體;而活性氧的表達(dá)水平升高(P<0.05),線粒體膜電位降低(P<0.05);并檢測到處理組SK-OV3細(xì)胞中cytochrome C和cleaved-caspase3蛋白的表達(dá)水平上調(diào)(P<0.05)。
結(jié)論:
高濃度抗壞血酸對體外培養(yǎng)的卵巢癌 SK-OV3細(xì)
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