兒童過(guò)敏性哮喘特異性免疫治療過(guò)程中IL-10、TGF-β1和CD4+CD25+T細(xì)胞的變化.pdf

1、背景與目的：過(guò)敏性支氣管哮喘是氣道慢性炎癥性疾病,該病的確切發(fā)病機(jī)制仍不十分清楚,長(zhǎng)期以來(lái),Th1/Th2比例失衡理論已被多數(shù)人接受,認(rèn)為過(guò)敏性哮喘是Th2細(xì)胞過(guò)度分化導(dǎo)致的變態(tài)反應(yīng)性疾病。然而,傳統(tǒng)的Th1/Th2比例失衡理論并不能解釋所有的發(fā)病機(jī)制。大量研究提示,抑制性細(xì)胞因子IL-10、TGF-β1和CD4+CD25+ T細(xì)胞可能在哮喘的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用,現(xiàn)已引起人們的廣泛關(guān)注。IL-10和TGF-β1是主要的免疫抑制性細(xì)

2、胞因子。IL-10可能是通過(guò)直接抑制T細(xì)胞增殖和分泌細(xì)胞因子、誘導(dǎo)免疫無(wú)能T細(xì)胞產(chǎn)生、抑制抗原遞呈細(xì)胞(DC、單核/巨噬細(xì)胞)間接抑制T細(xì)胞應(yīng)答、抑制特異性IgE分泌增加IgG4合成,抑制氣道炎癥,最終抑制哮喘的發(fā)生發(fā)展。TGF-β1在哮喘中的作用十分復(fù)雜,至今仍有爭(zhēng)議。大多數(shù)認(rèn)為局部的TGF-β1主要促進(jìn)炎癥的發(fā)展,而全身的TGF-β1則可能起到抑制炎癥的作用。CD4+CD25+T細(xì)胞包含CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulat

3、ory T cell,Treg)和活化的CD4+ T細(xì)胞,其中包含的CD4+CD25+ Treg是近來(lái)研究的熱點(diǎn),屬于免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞,可抑制免疫性疾病的發(fā)展。CD4+CD25+ Treg不僅可以抑制Th1細(xì)胞,還可抑制Th2細(xì)胞應(yīng)答,并且對(duì)后者的作用更強(qiáng)。隨著研究的深入近年發(fā)現(xiàn)在人類(lèi)僅僅CD4+CD25high Treg發(fā)揮強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)功能。對(duì)于哮喘的治療,長(zhǎng)期以來(lái)都是以抗炎、解痙為主。過(guò)敏原特異性免疫治療(allergen speci

4、fic immunotherapy,SIT)是唯一可能改變過(guò)敏性哮喘自然病程的對(duì)因治療,但其機(jī)制仍不十分清楚。本文通過(guò)觀察對(duì)塵螨過(guò)敏的兒童哮喘患者SIT的治療效果和治療前后外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheralblood mononuclear cells,PBMCs)中IL-10、TGF-β1 mRNA表達(dá)情況以及CD4+CD25+ T細(xì)胞、CD4+CD25high T細(xì)胞占CD4+ T細(xì)胞的百分比,研究它們?cè)赟IT中的作用,初步探討

5、兒童過(guò)敏性哮喘特異性免疫治療的機(jī)制,從而為哮喘的防治提供新思路。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)選取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科門(mén)診40例過(guò)敏性哮喘患兒,男24例,女16例,平均年齡8.42歲。所有的病人都有明確的哮喘病史和癥狀,符合支氣管哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn),皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)塵螨抗原陽(yáng)性,采用Alutard屋塵螨變應(yīng)原制劑(ALK丹麥)脫敏方法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化脫敏治療。根據(jù)其治療時(shí)間分為SIT治療前組、治療1年后組和治療2年后組三組。分別于治療前、治療1年后、治療

6、2年后采集外周靜脈血。利用SYBR GreenⅠ熒光定量PCR的方法檢測(cè)每組標(biāo)本PBMCs中IL-10和TGF-β1 mRNA的表達(dá)情況;利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)每組標(biāo)本CD4+CD25+ T細(xì)胞、CD4+CD25high T細(xì)胞分別占CD4+ T細(xì)胞的百分比;同時(shí),觀察SIT的臨床療效。
　　結(jié)果：采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果隨著特異性免疫治療時(shí)間的延長(zhǎng),IL-10 mRNA的表達(dá)在治療1年后組顯著升高,是治療前組的3.29倍

7、,治療2年后組表達(dá)水平又顯著降低,是治療前組的1.01倍;TGF-β1 mRNA的表達(dá)在治療1年后組稍有降低,但治療2年后組又回升,整體變化不大。CD4+CD25+ T細(xì)胞占CD4+ T細(xì)胞的百分比在特異性免疫治療前后無(wú)顯著差異(P>0.05);CD4+CD25high T細(xì)胞占CD4+ T細(xì)胞的百分比在特異性免疫治療后1年顯著增高(P<0.05),治療后2年仍維持高水平?；純号R床癥狀明顯減輕。
　　結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了哮喘患