急性T細(xì)胞白血病原癌基因Lmo2轉(zhuǎn)錄剪接及編碼產(chǎn)物特征的研究.pdf

1、Lmo2是隸屬于LIM蛋白家族的一個(gè)T細(xì)胞白血病原癌基因.為進(jìn)一步加深對Lmo2轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)調(diào)控方式的認(rèn)識,該論文進(jìn)行了以下幾個(gè)方面的工作:1、我們以正常成人腎組織mRNA為材料,結(jié)合新近發(fā)展的SMART PCR及5'RACE技術(shù)找到了Lmo2基因的一種新的5'剪接模式.克隆到此剪接模式的全長cDNA并進(jìn)行序列分析,發(fā)現(xiàn)這個(gè)新的轉(zhuǎn)錄本具有與以往不同的轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn),編碼一個(gè)151氨基酸的蛋白質(zhì);有趣的是,此蛋白只是N端7個(gè)氨基酸序列與原先

2、報(bào)道的LMO2蛋白有差異,其余則完全相同.2、將含有推測的轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游294核苷酸至下游180核苷酸的基因組片段插入報(bào)導(dǎo)基因載體pGL3-Basic并轉(zhuǎn)染Cos-7細(xì)胞系,檢測到穩(wěn)定的啟動(dòng)子活性.3、對各種不同來源的人組織、細(xì)胞系進(jìn)行RT-PCR檢測,發(fā)現(xiàn)此種剪接模式以不同豐度廣泛存在.4、在人類基因組序列數(shù)據(jù)庫中檢索Lmo2基因序列,經(jīng)過對原先報(bào)道的Lmo2 mRNA序列修正后意外地找到符合原讀碼框的更上游的ATG起始密碼,將此延長