乙型腦炎病毒活疫苗株減毒的分子基礎(chǔ)和瘧疾感染的免疫學(xué)研究.pdf

1、乙腦病毒減毒活疫苗SA<,14>-14-2株已在中國(guó)成功使用多年,大大降低了乙腦的發(fā)病率,目前已被WHO推薦推廣使用.該研究對(duì)疫苗株、減毒中間株進(jìn)行全序列測(cè)定,探索疫苗減毒的分子基礎(chǔ),并對(duì)乙腦病毒感染性克隆的構(gòu)建方法進(jìn)行了研究,不僅有利于闡明病毒的致病性、減毒及穩(wěn)定性機(jī)理,也將為促進(jìn)該疫苗走向世界有所貢獻(xiàn).乙型腦炎病毒的研究主要完成以下工作:1.對(duì)乙腦病毒活疫苗生產(chǎn)株SA<,14>-14-2株的全序列進(jìn)行了分段克隆和測(cè)序,與已發(fā)表序列對(duì)

2、比,基本一致也略有差異,提出了可通過監(jiān)控幾個(gè)位點(diǎn)對(duì)疫苗生產(chǎn)質(zhì)量進(jìn)行控制.2.首次對(duì)乙腦病毒減毒中間株SA<,14>-12-1-7的全序列進(jìn)行了克隆和測(cè)序,并與疫苗株、野毒株序列進(jìn)行比較,推測(cè)決定病毒減毒及穩(wěn)定性的位點(diǎn),為闡明病毒致病機(jī)理奠定了基礎(chǔ).3.在全序列測(cè)定基礎(chǔ)上,將疫苗株各段通過酶切、體外連接成全長(zhǎng)基因組cDNA,并體外轉(zhuǎn)錄成RNA后,轉(zhuǎn)染細(xì)胞獲得感染性克隆.目前已觀察到細(xì)胞病變,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)上清進(jìn)行的RT-PCR鑒定表明,病毒具