已酮可可堿對體外內毒素誘導大鼠心肌細胞生成TNF-α的影響.pdf

1、目的：腫瘤壞死因子α(TNF-α)在心力衰竭發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，已證實慢性心力衰竭患者血漿TNF-α水平明顯升高。已酮可可堿是一種黃嘌呤衍生物，臨床試驗證實它可以改善心力衰竭患者的臨床狀況；動物實驗亦報道已酮可可堿作為一種免疫調節(jié)劑可以抑制人類單核細胞生成腫瘤壞死因子-α。因此我們假設在心肌細胞中它有相似的作用機制。此實驗旨在通過觀察已酮可可堿對內毒素誘導新生大鼠心肌細胞生成TNF-α的影響，探討已酮可可堿對大鼠心肌細胞可能的保護機

2、制。 材料與方法：取新生大鼠的心肌細胞加以培養(yǎng)，按不同的藥物處理分為四組：對照組(A組)、1μg/ml已酮可可堿組(B組)、10μg/ml已酮可可堿組(C組)、100μg/ml已酮可可堿組(D組)。加入生理鹽水(A組)和不同濃度的已酮可可堿(B、C、D組)作用一定時間后，再加入內毒素刺激TNF-α生成。作用6小時后，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)法測定新生大鼠心肌細胞TNF-α的生成，用逆轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)法檢

3、測TNF-αmRNA的表達。 結果：已酮可可堿干預后，新生大鼠心肌細胞培養(yǎng)液中TNF-α的生成受到不同程度的抑制，且與預處理的已酮可可堿濃度呈正相關。其中1μg/ml已酮可可堿組、10μg/ml已酮可可堿組、100μg/ml已酮可可堿組的TNF-α的生成[(83.37±16.39)pg/ml，(35.43±2.60)pg/ml，(19.72±5.19)pg/ml]都顯著低于對照組[(98.50±7.99)pg/ml](P＜0.0

4、5)；已酮可可堿干預后，新生大鼠心肌細胞TNF-αmRNA的表達均受到不同程度的抑制，且與已酮可可堿濃度呈正相關。其中1μg/ml已酮可可堿組、10μg/ml已酮可可堿組、100μg/ml已酮可可堿組心肌細胞TNF-αmRNA表達(0.78±0.02，0.71±0.04,0.62±0.04)都顯著低于對照組(0.90±0.02)(P＜0.05)。 結論：已酮可可堿能有效抑制內毒素誘導的新生大鼠心肌細胞產生TNT-α，并能有效減少